[發(fā)明專利]用于活菌制劑中的雜菌檢測的培養(yǎng)基

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911304711.7
• 申請日: 2019-12-17
• 公開（公告）號: CN112980919B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李穎;傅葉青;呂春懷;姚詩婷;俞雅君
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州遠(yuǎn)大生物制藥有限公司
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/06
• 代理公司: 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 肖陽

本發(fā)明提出了一種培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基用于活菌制劑中的雜菌檢測，所述培養(yǎng)基包括無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)和脫氧膽酸鈉或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體，所述無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)包括蛋白胨、氯化鈉、牛肉浸出粉。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的培養(yǎng)基可有效用于活菌制劑中的雜菌的檢測，克服了現(xiàn)有技術(shù)中活菌制劑菌(如蠟樣芽孢桿菌)的干擾，造成假陰性問題，提高了活菌制劑中雜菌檢測的準(zhǔn)確性，提高了含芽孢類菌微生態(tài)制劑的安全性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥檢測領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及用于活菌制劑中的雜菌檢測的培養(yǎng)基，更具體地，本發(fā)明涉及脫氧膽酸鈉和無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)在制備培養(yǎng)基中的用途、用于活菌制劑中的雜菌檢測的培養(yǎng)基以及活菌制劑中的雜菌進(jìn)行檢測的方法。

背景技術(shù)

在活菌制劑的制備過程中，由于原輔料包材中有時會含有及其微量的或者在活菌制劑的制備過程會引入微量的雜菌，如芽孢菌，其代表菌株為枯草芽孢桿菌，革蘭氏陽性球菌，其代表菌株為金黃色葡萄球菌。出于藥品安全的考慮，該雜菌的含量必須嚴(yán)格控制在安全范圍內(nèi)，才可上市。

目前市售含有芽孢類的產(chǎn)品如：思連康的雙歧桿菌四聯(lián)活菌片、整腸生的地衣芽孢桿菌活菌膠囊和地衣芽孢桿菌活菌顆粒、京常樂的地衣芽孢桿菌活菌膠囊、天悅婷的枯草桿菌活菌膠囊、美常安的枯草桿菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊、媽咪愛的枯草桿菌、腸球菌二聯(lián)活菌多維顆粒劑、源首的蠟樣芽孢桿菌活菌膠囊、常復(fù)康的蠟樣芽孢桿菌片、阿泰寧的酪酸梭菌活菌膠囊、常立寧的酪酸梭菌活菌片、寶樂安的酪酸梭菌活菌散、米桑的酪酸梭菌活菌膠囊、常樂康的酪酸梭菌二聯(lián)活菌散和酪酸梭菌二聯(lián)活菌膠囊、爽舒寶的凝結(jié)芽孢桿菌活菌片以及米雅的酪酸梭菌活菌散劑和酪酸梭菌活菌片。

而現(xiàn)有的活菌制劑的藥典規(guī)定的雜菌的檢測方法中采用的培養(yǎng)基無法排除含有芽孢類菌微生態(tài)制劑中芽孢桿菌對檢測的干擾。因此，如果采用現(xiàn)有的方法檢測活菌制劑的雜菌的含量，不可避免的會產(chǎn)生假陰性的檢測結(jié)果，對藥品的安全存在極大隱患；同時，活菌制劑如果含有芽孢桿菌，采用現(xiàn)有的方法檢測活菌制劑的雜菌的含量時，芽孢桿菌會在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上生長蔓延嚴(yán)重，干擾雜菌辨別，故無法用現(xiàn)有方法進(jìn)行雜菌檢測，因此需要尋找一種能夠抑制目標(biāo)菌的物質(zhì)，達(dá)到抑制微生態(tài)制劑中芽孢類菌生長，但不干擾雜菌的生長。

因此，開發(fā)一種新型的可用于活菌制劑的雜菌有效檢測的培養(yǎng)基和方法，是保證活菌制劑用藥安全的必要舉措。

發(fā)明內(nèi)容

本申請的發(fā)明人基于對現(xiàn)有抑菌劑和檢測活菌制劑的雜菌培養(yǎng)基成分的認(rèn)識，通過抑菌劑的篩選實(shí)驗，并有目地逐步降低現(xiàn)有培養(yǎng)基中的抑菌劑(伊紅Y和美藍(lán))的含量，又或者替換為所篩選出的抑菌劑，通過考察雜菌在培養(yǎng)基中的回收率以及培養(yǎng)基對該雜菌生長的影響，確定了一種可同時應(yīng)用于活菌劑中金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌和白色念珠菌含量檢測的培養(yǎng)基和方法，克服了現(xiàn)有技術(shù)中活菌制劑的雜菌檢測的假陰性問題和蠟樣芽孢桿菌會在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上生長蔓延而干擾雜菌辨別的問題，提高了活菌制劑的用藥安全性。

在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基用于活菌制劑中的雜菌檢測。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述培養(yǎng)基包括無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)和脫氧膽酸鈉或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體，所述無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)包括蛋白胨、氯化鈉和牛肉浸出粉。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)可降低大腸桿菌利用乳糖代謝所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物對檢測所產(chǎn)生的干擾，同時，無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)不利于活菌制劑中活性成分菌的生長，可進(jìn)一步降低活菌制劑中的活性成分菌對雜菌檢測的干擾。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例培養(yǎng)基一方面通過無乳糖培養(yǎng)基質(zhì)克服了活菌制劑中活性成分菌對雜菌檢測的干擾，另一方面脫氧膽酸鈉或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體作為抑菌劑替代原有的伊紅Y和美藍(lán)對活菌制劑中的活性成分菌進(jìn)一步抑制而對活菌制劑中雜菌抑制作用微小，使得活菌制劑中的雜菌可在該培養(yǎng)基中選擇性生長和擴(kuò)增。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的培養(yǎng)基可有效用于活菌制劑中的雜菌的計數(shù)，克服了現(xiàn)有技術(shù)中活菌制劑的雜菌檢測的假陰性問題，提高了活菌制劑的用藥安全性。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，上述培養(yǎng)基還可以進(jìn)一步包括如下附加技術(shù)特征至少之一：