[發明專利]一種快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙

在審

• 申請號: 201911301305.5
• 申請日: 2019-12-17
• 公開（公告）號: CN110927133A
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發明（設計）人: 鄧莉;王立博;張永輝;王毅;羅丹;張朝霞;陳晨;田麗;舒玲;蘇明
• 申請（專利權）人: 四川省輕工業研究設計院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N33/533;G01N33/577;G01N33/558
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產權代理有限公司 51214
• 代理人: 胡東東

1.一種快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，包括底板(1)，其特征在于，所述底板(1)上依次并相互交錯粘貼有樣品墊(2)、結合墊(3)、包被膜(4)和吸水紙(7)，所述包被膜(4)一端的上端面與結合墊(3)的一端貼合，包被膜(4)的另一端的上端面與吸水紙(7)的一端貼合，包被膜(4)上包被有檢測線(5)和質控線(6)，結合墊(3)另一端的上端面與樣品墊(2)的一端貼合，檢測線(5)和質控線(6)相互不交叉，所述結合墊(3)上包被有熒光微球標記的鉛特異性抗體，所述檢測線(5)由鉛離子完全抗原構成，所述質控線(6)由羊抗鼠IgG構成。

2.如權利要求1所述的快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，其特征在于，所述樣品墊(2)為玻璃纖維棉，所述結合墊(3)為聚酯纖維膜，所述包被膜(4)為硝酸纖維素膜。

3.如權利要求2所述的快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，其特征在于，所述檢測線(5)和質控線(6)相互平行且留有間距，所述檢測線(5)靠近結合墊(3)，所述質控線(6)靠近吸水紙(7)。

4.如權利要求1－3之一所述的快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，其特征在于，所述鉛特異性抗體為鼠源性單克隆抗體，所述熒光微球為直徑為100－300nm的稀土銪離子螯合物摻雜的微球，微球表面帶有活性基團羧基。

5.如權利要求4所述的快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，其特征在于，所述鉛離子完全抗原為鉛離子、螯合劑以及載體蛋白形成的偶合物。

6.如權利要求5所述的快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，其特征在于，所述螯合劑為乙二胺四乙酸，載體蛋白為牛血清蛋白。

7.如權利要求6所述的快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，其特征在于，結合墊(3)上的熒光微球標記的鉛特異性抗體噴涂層的形成方法包括以下步驟：

步驟1、將設計量的銪離子螯合物熒光微球加入到預先配比好的硼酸緩沖溶液中，然后超聲分散；

步驟2、步驟1完成后，向溶液中加入設計量的碳二亞胺和N－羥基琥珀酰亞胺，振蕩反應后進行離心洗滌，然后分散于硼酸緩沖溶液中；

步驟3、步驟2完成后，向溶液中加入設計量的鉛離子抗體溶液，振蕩反應8h以上；

步驟4、對步驟3得到的溶液進行離心分離，然后用含牛血清蛋白的硼酸緩沖溶液封閉保存1－3h，然后再離心洗滌后置于硼酸緩沖溶液中于3－6℃下保存，得到儲存液；

步驟5、將儲存液按體積比1：(90－100)的比例稀釋于含牛血清蛋白、Tween－20、聚乙烯吡咯烷酮、海藻糖、疊氮化鈉的硼酸緩沖溶液中，使用定量噴膜儀噴涂于結合墊(3)上，在30－40℃下鼓風烘干，然后在3－6℃下避光干燥即得。

8.如權利要求7所述的快速檢測食品中重金屬鉛的熒光免疫層析試紙，其特征在于，在步驟5中，所述硼酸緩沖溶液中，含有質量濃度為0.4－0.6％的牛血清蛋白、體積分數為2－3％的Tween－20、質量濃度為0.4－0.6％的聚乙烯吡咯烷酮、質量濃度為1－3％的海藻糖和質量濃度為0.01－0.03％的疊氮化鈉，該硼酸緩沖溶液的pH值為8.0－8.5。