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[發(fā)明專利]一種復蘇植物墊狀卷柏的組培繁殖方法有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201911296273.4 申請日: 2019-12-16
公開(公告)號: CN110800617B 公開(公告)日: 2022-08-02
發(fā)明(設計)人: 余蓉培;汪國鮮;浦艷飛;李帆;盧珍紅;莫錫君 申請(專利權)人: 云南省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究所;玉溪云星生物科技有限公司
主分類號: A01H4/00 分類號: A01H4/00
代理公司: 云南凌云律師事務所 53207 代理人: 康珉
地址: 650205 云南*** 國省代碼: 云南;53
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 復蘇 植物 卷柏 繁殖 方法
【權利要求書】:

1.一種復蘇植物墊狀卷柏的組培繁殖方法,其特征在于包括以下步驟:

(1)無菌外植體的獲得

選取野生墊狀卷柏植株的幼嫩枝條尖端作為外植體,經(jīng)過消毒滅菌后,獲得無菌外植體;所述幼嫩枝條為墊狀卷柏植株中心生長點向外數(shù)第2~3層的枝條;所述消毒滅菌方式具體是用1%v/v的洗潔精水對外植體進行表面清潔,然后放置于燒杯中,燒杯上覆蓋紗布,用流動水沖洗2~2.5小時;再在無菌條件下,將外植體用消毒劑消毒滅菌12~15分鐘,隨后用無菌水沖洗5~6次,每次沖洗2~3分鐘;所述的消毒劑是濃度為0.1%w/v的HgCl2溶液;

(2)原生芽的誘導

將步驟(1)中獲得的無菌外植體接種在原生芽誘導培養(yǎng)基上,放置于20~25℃培養(yǎng)室中進行暗培養(yǎng),暗培養(yǎng)周期為30~45天,所述原生芽誘導培養(yǎng)基為:1/2MS+6-BA 0.1~0.2mg/L+NAA 0.1~0.2mg/L+檸檬酸400~500mg/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂7.0g/L,pH為5.80;

(3)不定芽的增殖

將步驟(2)中獲得的原生芽接種在不定芽增殖培養(yǎng)基上,放置于培養(yǎng)室中進行增殖培養(yǎng),增殖培養(yǎng)的周期為50~60天,所述不定芽增殖培養(yǎng)基為:1/2MS+6-BA 0.8~1.0mg/L+NAA 0.05~0.1mg/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂7.0g/L,pH為5.80;所述增殖培養(yǎng)環(huán)境條件為:20~25℃,光照強度為30~40μmol·m-2·s-1,每天光照時間為16小時;

(4)組培苗壯苗和生根培養(yǎng)

待步驟(3)中不定芽的高度達到5~7mm時,將單個的不定芽切割下來,接種于組培苗壯苗和生根培養(yǎng)基上,放置于與步驟(3)相同的培養(yǎng)環(huán)境條件下培養(yǎng),組培苗壯苗和生根培養(yǎng)周期為70~80天,所述組培苗壯苗和生根培養(yǎng)基為:1/4~1/2MS+活性炭1~2g/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂7.0g/L,pH為5.80。

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