[發(fā)明專利]一種復蘇植物墊狀卷柏的組培繁殖方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911296273.4 | 申請日: | 2019-12-16 |
| 公開(公告)號: | CN110800617B | 公開(公告)日: | 2022-08-02 |
| 發(fā)明(設計)人: | 余蓉培;汪國鮮;浦艷飛;李帆;盧珍紅;莫錫君 | 申請(專利權)人: | 云南省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究所;玉溪云星生物科技有限公司 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 云南凌云律師事務所 53207 | 代理人: | 康珉 |
| 地址: | 650205 云南*** | 國省代碼: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 復蘇 植物 卷柏 繁殖 方法 | ||
1.一種復蘇植物墊狀卷柏的組培繁殖方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)無菌外植體的獲得
選取野生墊狀卷柏植株的幼嫩枝條尖端作為外植體,經(jīng)過消毒滅菌后,獲得無菌外植體;所述幼嫩枝條為墊狀卷柏植株中心生長點向外數(shù)第2~3層的枝條;所述消毒滅菌方式具體是用1%v/v的洗潔精水對外植體進行表面清潔,然后放置于燒杯中,燒杯上覆蓋紗布,用流動水沖洗2~2.5小時;再在無菌條件下,將外植體用消毒劑消毒滅菌12~15分鐘,隨后用無菌水沖洗5~6次,每次沖洗2~3分鐘;所述的消毒劑是濃度為0.1%w/v的HgCl2溶液;
(2)原生芽的誘導
將步驟(1)中獲得的無菌外植體接種在原生芽誘導培養(yǎng)基上,放置于20~25℃培養(yǎng)室中進行暗培養(yǎng),暗培養(yǎng)周期為30~45天,所述原生芽誘導培養(yǎng)基為:1/2MS+6-BA 0.1~0.2mg/L+NAA 0.1~0.2mg/L+檸檬酸400~500mg/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂7.0g/L,pH為5.80;
(3)不定芽的增殖
將步驟(2)中獲得的原生芽接種在不定芽增殖培養(yǎng)基上,放置于培養(yǎng)室中進行增殖培養(yǎng),增殖培養(yǎng)的周期為50~60天,所述不定芽增殖培養(yǎng)基為:1/2MS+6-BA 0.8~1.0mg/L+NAA 0.05~0.1mg/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂7.0g/L,pH為5.80;所述增殖培養(yǎng)環(huán)境條件為:20~25℃,光照強度為30~40μmol·m-2·s-1,每天光照時間為16小時;
(4)組培苗壯苗和生根培養(yǎng)
待步驟(3)中不定芽的高度達到5~7mm時,將單個的不定芽切割下來,接種于組培苗壯苗和生根培養(yǎng)基上,放置于與步驟(3)相同的培養(yǎng)環(huán)境條件下培養(yǎng),組培苗壯苗和生根培養(yǎng)周期為70~80天,所述組培苗壯苗和生根培養(yǎng)基為:1/4~1/2MS+活性炭1~2g/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂7.0g/L,pH為5.80。
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