[發(fā)明專利]一種枸杞多糖的摻雜鑒別及含量檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911296099.3
• 申請日: 2019-12-16
• 公開（公告）號: CN110927286B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李文德;陳尚衛(wèi);楊浩;戴軍;陳安平;徐一達(dá)
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江尖峰健康科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 彭啟強(qiáng)

本發(fā)明涉及多糖檢測技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種枸杞多糖的摻雜鑒別及含量檢測方法，步驟包括，對枸杞進(jìn)行脫脂、熱水浸提和醇沉；用超純水溶解定容，并混勻過濾；加入復(fù)合糖化酶進(jìn)行酶解，將霉解液中加入無水乙醇，離心，取沉淀加水溶解，過濾；進(jìn)行水解及衍生反應(yīng)，得到進(jìn)樣液；對進(jìn)樣液進(jìn)行色譜分析，通過測量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡萄糖的峰面積百分比，進(jìn)行摻雜鑒別；通過測量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡萄糖的峰面積百分比得到枸杞多糖總百分比，乘以M1和校正系數(shù)0.9后得到枸杞多糖的含量。本發(fā)明能夠準(zhǔn)確的鑒別出枸杞多糖提取物是否摻雜有糊精或者可溶性淀粉，并能夠?qū)?zhǔn)確測定摻雜枸杞多糖提取物樣品中枸杞多糖的實際含量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及多糖檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種枸杞多糖的摻雜鑒別及含量檢 測方法。

背景技術(shù)

枸杞多糖是我國傳統(tǒng)中藥枸杞子中的重要生物活性成分，具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫 力、抗氧化、保護(hù)神經(jīng)、降血糖、抗腫瘤等多種生理功效。因此，近年來作為功 能性食品配料的枸杞多糖產(chǎn)品的開發(fā)和應(yīng)用發(fā)展較快。

然而，由于目前對枸杞多糖的檢測尚缺乏有效的質(zhì)量檢測方法和完善的質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)，同時因干燥等工藝的需要，或不排除人為故意摻雜以求較高的多糖含量和 價格，導(dǎo)致目前枸杞多糖產(chǎn)品中往往會摻入較多的麥芽糊精(或可溶性淀粉淀 粉)?，F(xiàn)有相關(guān)文獻(xiàn)的定性定量方法尚不適用于該類產(chǎn)品，即I-KI試劑難以準(zhǔn)確 鑒別顏色較深的枸杞多糖產(chǎn)品中是否摻有糊精或淀粉，測定多糖含量的醇沉-苯 酚硫酸法不能完全排除糊精干擾，因而已有的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)難以客觀鑒別和評價該類 產(chǎn)品質(zhì)量，其摻雜產(chǎn)品有可能給企業(yè)用戶和廣大消費者帶來不應(yīng)有的利益損失。

近年來，隨著人們對食品質(zhì)量真實性檢測技術(shù)的日益重視，有研究者根據(jù)多 糖水解物中葡萄糖的相對比例推測枸杞多糖樣品可能摻有糊精，但目前的這個方 法尚不能確證是否摻雜，且不能準(zhǔn)確測定摻雜枸杞樣品中枸杞多糖的實際含量。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種枸杞多糖的摻雜鑒別及含量檢測方法， 能夠準(zhǔn)確的鑒別出枸杞多糖提取物是否摻雜有糊精或者可溶性淀粉，并能夠?qū)?zhǔn) 確測定摻雜枸杞多糖提取物樣品中枸杞多糖的實際含量。

本發(fā)明通過以下技術(shù)手段解決上述技術(shù)問題：

一種枸杞多糖的摻雜鑒別及含量檢測方法，包括以下步驟，

A1、對枸杞進(jìn)行多糖提取，包括脫脂、熱水浸提、醇沉和干燥，得到枸杞多 糖粗品，稱重得到M1；

A2、將枸杞多糖粗品用超純水溶解，并混勻、過濾，得到預(yù)檢液；

A3、在預(yù)檢液中加入復(fù)合糖化酶進(jìn)行酶解，霉解后殺酶得到霉解液，將霉解 液中加入無水乙醇，振搖后靜置，離心，取沉淀加水溶解，過濾后得到多糖水溶 解液；

A4、將多糖水溶解液進(jìn)行水解及衍生反應(yīng)，得到進(jìn)樣液；

A5、對進(jìn)樣液進(jìn)行色譜分析，通過測量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡 萄糖的峰面積百分比，進(jìn)行摻雜鑒別；

A6、通過測量半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和氨基葡萄糖的峰面積百分比得到 枸杞多糖總百分比，乘以M1和校正系數(shù)0.9后得到枸杞多糖的含量。

半乳糖、阿拉伯糖、氨基葡萄糖和葡萄糖這4個單糖是枸杞多糖中功能活性 較強(qiáng)的多糖級分的主要單糖組分，因此，半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖及氨基葡萄 糖4個單糖可看作是枸杞多糖中較重要的標(biāo)志性糖組分，它們的反相色譜指紋特 征即峰面積相對比例可以作為枸杞多糖的重要質(zhì)量指標(biāo)，也可以用于鑒別真?zhèn)魏?摻雜。

進(jìn)一步，所述步驟A6中的校正系數(shù)為0.9。對于分子量不同的單糖聚合成 多糖的校正系數(shù)略有不同，但經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，將所有單糖總含量乘以六碳糖的校正 系數(shù)0.9計算的結(jié)果與分別按枸杞中幾種不同分子量單糖的校正系數(shù)計得的結(jié) 果非常相近，因此，對于單糖含量換算成枸杞多糖含量的校正系數(shù)按0.9計更準(zhǔn) 確。