[發明專利]超聲波輔助酶法提取的百尾參多糖、其方法及應用

有效

• 申請號: 201911281242.1
• 申請日: 2019-12-13
• 公開（公告）號: CN110950972B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 甘秀海;宋寶安;胡德禹;吳劍;張建;陳吉祥
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A01N65/42;A01N43/16;A01P1/00;A61K31/715;A61K36/896;A61P35/00
• 代理公司: 貴陽東圣專利商標事務有限公司 52002
• 代理人: 袁慶云

1.一種超聲波輔助酶法提取的百尾參多糖，按質量份數取1份過60目篩后的百尾參粉末浸泡于15~50份的蒸餾水中并調pH值至3.5~7.0，于30~70℃下保溫靜置15~30 min；然后加入百尾參干粉質量0.1~10%的酶，于30~70℃下酶解0.5~3 h，得混合物； 30~70℃下超聲提取10~60 min； 80~90 ℃下滅酶處理5~20 min；室溫冷卻，于3000~6000 rpm離心10~30min，取上清液用旋轉蒸發儀濃縮至1/2~1/5體積，然后加入4~5倍濃縮液體積的無水乙醇，于4℃下靜置2~8h，5000~6000 rpm離心10~20 min，再經無水乙醇洗滌，冷凍干燥得到；

其中所述的酶為α-淀粉酶、β-淀粉酶、半乳糖苷酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、半纖維素酶、β-葡萄糖苷酶和纖維素酶中的一種或兩種組分比例1：10~10：1的混合物。

2.一種超聲波輔助酶法提取百尾參多糖的方法，其包含以下步驟：

（1）將干燥的百尾參粉碎后過60目篩；

（2）按質量份數取1份過篩后的百尾參粉末浸泡于15~50份的蒸餾水中并調pH值至3.5~7.0，于30~70℃下保溫靜置15~30 min；

（3）然后加入百尾參干粉質量0.1~10%的酶，于30~70℃下酶解0.5~3 h，得混合物；

（4）將混合物置于超聲儀中，30~70℃下超聲提取10~60 min，其功率為180~400 W；

（5）然后置于80~90 ℃下滅酶處理5~20 min，使酶制劑變性失活；

（6）滅酶處理后室溫冷卻，于3000~6000 rpm離心10~30 min，除去蛋白和多肽，上清液即百尾參多糖提取液；

（7）用旋轉蒸發儀將百尾參多糖提取液濃縮至1/2~1/5體積，然后加入4~5倍濃縮液體積的無水乙醇，于4℃下靜置2~8h沉淀多糖，5000~6000 rpm離心10~20 min，再經無水乙醇洗滌，冷凍干燥得到百尾參粗多糖;

其中：步驟（3）中的酶為α-淀粉酶、β-淀粉酶、半乳糖苷酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、半纖維素酶、β-葡萄糖苷酶和纖維素酶中的一種或兩種組分比例1：10~10：1的混合物。

3.如權利要求1所述的一種超聲波輔助酶法提取的百尾參多糖或如權利要求2所述的一種超聲波輔助酶法提取百尾參多糖的方法制備的百尾參多糖在制備抑制腫瘤細胞藥物和抗植物病毒藥物中的應用；其中所述的腫瘤細胞為前列腺癌增生細胞、腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞、黑色素瘤細胞和人乳腺癌細胞，所述的植物病毒為煙草花葉病毒和黃瓜花葉病毒。