[發明專利]木芙蓉內源細胞分裂素提取劑及其使用方法

有效

• 申請號: 201911279805.3
• 申請日: 2019-12-13
• 公開（公告）號: CN110988172B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 劉曉莉;夏中梅;王強鋒;林楊;胡鳳科;徐遠超;馬嬌;劉興鳳;朱章順;侯勇
• 申請（專利權）人: 成都市植物園;四川省農業科學院生物技術核技術研究所;四川省蘭月科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/72
• 代理公司: 成都立新致創知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 51277
• 代理人: 譚德兵

1.木芙蓉內源細胞分裂素提取劑的使用方法，木芙蓉內源細胞分裂素提取劑由A劑和B劑按照質量比1～2:1的比例混合后制備而成；其特征在于，包括以下步驟：

a、制備：制備木芙蓉內源細胞分裂素提取劑：將A劑和B劑按照質量比1～2:1的比例混合后制備得到木芙蓉內源細胞分裂素提取劑，10℃下低溫保存，待用；

所述A劑是由甘氨酸、鄰苯二甲酸、磷酸氫二鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉、氫氧化鈉、乙酸、乙酸鈉、鹽酸中的至少2種，用重蒸水溶解后配制成pH在2～3的混合水溶液；

所述B劑為甲醇；

b、提取：取木芙蓉組織破碎樣品，與a步驟得到的木芙蓉內源細胞分裂素提取劑按照固液比1g:5～10mL混合后，在低于10℃環境下靜置4～8h，抽濾，收集濾液Ⅰ，所得濾渣Ⅰ再用步驟a得到的木芙蓉內源細胞分裂素提取劑按照固液比1g:2.5～5mL浸提1～2h，抽濾，收集得到濾液Ⅱ和濾渣Ⅱ；濾渣Ⅱ再用步驟a得到的木芙蓉內源細胞分裂素提取劑浸提按照固液比1g:1～2.5mL浸提1h，抽濾，收集得到濾液Ⅲ和濾渣Ⅲ；

c、純化：合并c步驟得到的濾液Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，通過PVPP固液萃取小柱萃取，收集過柱液體，即為木芙蓉組織樣品內源細胞分裂素待測液。

2.根據權利要求1所述使用方法，其特征在于，步驟b中所述木芙蓉組織樣品為木芙蓉葉、花瓣、花柄、花萼、枝條或根、莖組織或器官中的至少一種。

3.根據權利要求1所述使用方法，其特征在于，將步驟c得到的木芙蓉組織樣品內源細胞分裂素待測液采用HPLC或LC-MS檢測，得到木芙蓉樣品內源細胞分裂素的含量。