[發(fā)明專利]PP2CG1基因在調(diào)控擬南芥耐低溫脅迫中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911277169.0
• 申請日: 2019-12-12
• 公開（公告）號: CN112980869A
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊淑華;呂健;張曉燕
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/11;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 黃爽

1.PP2CG1基因在調(diào)控擬南芥耐低溫脅迫中的應(yīng)用，其特征在于，其中，PP2CG1基因為編碼如下蛋白質(zhì)(a)或(b)的基因：

(a)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

(b)SEQ ID NO:1所示序列經(jīng)取代、缺失或添加一個或幾個氨基酸且具有同等功能的由(a)衍生的蛋白質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述調(diào)控為負(fù)調(diào)控。

3.一種提高擬南芥耐冷性的方法，其特征在于，所述方法包括：利用基因工程手段，對擬南芥PP2CG1基因進行定點突變，使得該基因功能缺失，從而提高擬南芥的耐冷性；或者，

通過敲除或降低擬南芥PP2CG1基因的表達(dá)，從而提高擬南芥的耐冷性；

其中，所述PP2CG1基因的定義同權(quán)利要求1中所述。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，針對擬南芥中的目標(biāo)基因PP2CG1設(shè)計基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列，將含有編碼所述sgRNA序列的DNA片段連接到攜帶CRISPR/Cas的載體中，轉(zhuǎn)化擬南芥，實現(xiàn)對擬南芥基因PP2CG1的定點突變，進而獲得該基因功能缺失的轉(zhuǎn)基因擬南芥植株。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，sgRNA作用位點的核苷酸序列為5’-CACTGCTTGTGAGGTGCCT-3’和5’-CACAAGCAGTGCTACTAGG-3’。

6.根據(jù)權(quán)利要求3-5任一項所述方法獲得的擬南芥在植物育種中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，育種目的是選育耐低溫型植物。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，育種方法包括轉(zhuǎn)基因、雜交、回交、自交或無性繁殖。

9.PP2CG1基因打靶載體，其特征在于，所述打靶載體是以擬南芥PP2CG1基因為靶點設(shè)計基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列，將含有編碼所述sgRNA序列的DNA片段連接到攜帶CRISPR/Cas的載體中構(gòu)建得到的；

其中，所述PP2CG1基因的定義同權(quán)利要求1中所述；

sgRNA作用位點的核苷酸序列為5’-CACTGCTTGTGAGGTGCCT-3’和5’-CACAAGCAGTGCTACTAGG-3’。

10.靶向編輯PP2CG1基因的CRISPR/Cas9系統(tǒng)在提高擬南芥耐冷性中的應(yīng)用，其中，所述PP2CG1基因的定義同權(quán)利要求1中所述。