[發明專利]PP2CG1基因在調控擬南芥耐低溫脅迫中的應用在審
| 申請號： | 201911277169.0 | 申請日： | 2019-12-12 |
| 公開（公告）號： | CN112980869A | 公開（公告）日： | 2021-06-18 |
| 發明（設計）人： | 楊淑華;呂健;張曉燕 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;C12N15/11;A01H5/00;A01H6/20 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 黃爽 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | pp2cg1 基因 調控 擬南芥 低溫 脅迫 中的 應用 | ||
1.PP2CG1基因在調控擬南芥耐低溫脅迫中的應用，其特征在于，其中，PP2CG1基因為編碼如下蛋白質(a)或(b)的基因：
(a)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；
(b)SEQ ID NO:1所示序列經取代、缺失或添加一個或幾個氨基酸且具有同等功能的由(a)衍生的蛋白質。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述調控為負調控。
3.一種提高擬南芥耐冷性的方法，其特征在于，所述方法包括：利用基因工程手段，對擬南芥PP2CG1基因進行定點突變，使得該基因功能缺失，從而提高擬南芥的耐冷性；或者，
通過敲除或降低擬南芥PP2CG1基因的表達，從而提高擬南芥的耐冷性；
其中，所述PP2CG1基因的定義同權利要求1中所述。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，針對擬南芥中的目標基因PP2CG1設計基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列，將含有編碼所述sgRNA序列的DNA片段連接到攜帶CRISPR/Cas的載體中，轉化擬南芥，實現對擬南芥基因PP2CG1的定點突變，進而獲得該基因功能缺失的轉基因擬南芥植株。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，sgRNA作用位點的核苷酸序列為5’-CACTGCTTGTGAGGTGCCT-3’和5’-CACAAGCAGTGCTACTAGG-3’。
6.根據權利要求3-5任一項所述方法獲得的擬南芥在植物育種中的應用。
7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，育種目的是選育耐低溫型植物。
8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，育種方法包括轉基因、雜交、回交、自交或無性繁殖。
9.PP2CG1基因打靶載體，其特征在于，所述打靶載體是以擬南芥PP2CG1基因為靶點設計基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列，將含有編碼所述sgRNA序列的DNA片段連接到攜帶CRISPR/Cas的載體中構建得到的；
其中，所述PP2CG1基因的定義同權利要求1中所述；
sgRNA作用位點的核苷酸序列為5’-CACTGCTTGTGAGGTGCCT-3’和5’-CACAAGCAGTGCTACTAGG-3’。
10.靶向編輯PP2CG1基因的CRISPR/Cas9系統在提高擬南芥耐冷性中的應用，其中，所述PP2CG1基因的定義同權利要求1中所述。
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