[發明專利]一株分泌蛇形菌素單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用

有效

• 申請號: 201911272254.8
• 申請日: 2019-12-12
• 公開（公告）號: CN110724192B
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 匡華;金國浩;胥傳來;徐麗廣;馬偉;劉麗強;吳曉玲;宋珊珊;胡擁明
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C07K16/14
• 分類號: C07K16/14;C12N5/20;C07K14/795;C07K1/107;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙) 32104
• 代理人: 時旭丹;張仕婷

1.一株分泌蛇形菌素單克隆抗體的雜交瘤細胞株OVA15，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，地址北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，分類命名為單克隆細胞株，保藏日期2019年10月14日，保藏編號CGMCCNo.18515。

2.蛇形菌素單克隆抗體，其特征在于：它由權利要求1所述保藏編號為CGMCC No.18515的雜交瘤細胞株OVA15分泌產生。

3.權利要求2所述蛇形菌素單克隆抗體的應用，其特征在于：用于檢測食品中蛇形菌素殘留物。

4.根據權利要求3所述蛇形菌素單克隆抗體的應用，其特征在于：所述食品具體為谷物。

5.根據權利要求3所述蛇形菌素單克隆抗體的應用，其特征在于：檢測方法為制備ELISA競爭法檢測蛇形菌素的試劑。

6.根據權利要求1所述雜交瘤細胞株OVA15，其特征在于：用于制備雜交瘤細胞株OVA15的蛇形菌素完全抗原的制備方法如下：

（1）蛇形菌素半抗原的制備：將蛇形菌素與琥珀酸酐反應引入活性羧基，得到蛇形菌素半抗原；

（2）蛇形菌素完全抗原的制備：將蛇形菌素半抗原溶解于N,N-二甲基甲酰胺溶液中，加入3倍蛇形菌素物質量的N-羥基琥珀酰亞胺NHS和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EDC，室溫磁力攪拌反應6-8h，稱為A液；將2000倍蛇形菌素物質量的血藍蛋白KLH加入至磷酸鹽緩沖液中，獲得B液；將A液逐滴加入到B液中，室溫反應過夜，經PBS溶液透析，除去未反應的小分子半抗原，獲得蛇形菌素完全抗原。

7.根據權利要求6所述雜交瘤細胞株OVA15，其特征在于所述蛇形菌素半抗原的結構式如下：

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8.根據權利要求6所述雜交瘤細胞株OVA15，其特征在于所述蛇形菌素完全抗原的結構式如下：

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