[發明專利]一種大腸桿菌表達的重組豬α干擾素制劑中去除內毒素的方法在審
| 申請號： | 201911253876.6 | 申請日： | 2019-12-09 |
| 公開（公告）號： | CN113024656A | 公開（公告）日： | 2021-06-25 |
| 發明（設計）人： | 趙明;魏波;叢雁方;曲信芹;蔣皓靜;劉曉婧 | 申請（專利權）人： | 青島蔚藍生物制品有限公司;青島動保國家工程技術研究中心有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/56 | 分類號： | C07K14/56;C07K19/00;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/34;C07K1/22 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 266109 山東省青*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 大腸桿菌 表達 重組 干擾素 制劑 去除 內毒素 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種應用尿囊素、多粘菌素B、硫酸銨沉淀和金屬螯合層析去除重組豬α干擾素溶液中內毒素的方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)將含帶有組氨酸標簽重組豬α干擾素的菌體高壓勻漿充分破碎菌體；
(2)加入1-5％尿囊素和20％的硫酸銨，4℃沉淀過夜,8000rpm 4℃離心棄沉淀；
(3)將上清中加入10-100ppm多粘菌素B和50％的硫酸銨，4℃沉淀過夜；8000rpm4℃離心棄上清，沉淀混懸后用金屬螯合層析進行純化收集洗脫液；
(4)洗脫液經過超濾脫鹽即可得到去除內毒素的重組豬α干擾素。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述組帶有組氨酸標簽豬α干擾素通過基因工程技術獲得。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述尿囊素添加量為1-5％。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述多粘菌素B添加量為10-100ppm。
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