[發明專利]一種卟啉修飾的穿膜肽及其制備和應用

在審

• 申請號: 201911246911.1
• 申請日: 2019-12-09
• 公開（公告）號: CN110922451A
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發明（設計）人: 李金宇;徐芃;宋美如;程子微;劉以暢
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/107;A61K47/64;A61K41/00;A61P35/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 饒文君;蔡學俊

本發明公開了一種卟啉修飾的的穿膜肽及其制備和應用，屬于抗腫瘤藥物設計、合成技術領域。本發明利用焦脫鎂葉綠素a的羧基，通過酰胺化將其鏈接在氨基暴露的穿膜肽上。利用卟啉衍生物焦脫鎂葉綠素a與血卟啉類似的性質，能嵌入人血清白蛋白的空腔中，從而延長多肽在體內的循環時間，結合卟啉的光動力作用，對腫瘤起到更加高效的殺傷作用。該化合物合成方法簡單，原料易得，成本低，副反應少，產率較高，易提純，有利于工業化生產。

技術領域

本發明屬于抗腫瘤藥物設計、合成技術領域，具體涉及一種卟啉修飾的穿膜肽及其制備和應用。

背景技術

現如今，科學技術的快速發展使得疾病的發現和治療都進入了一個新的階段，很多疑難雜癥都有了相對應的優化方案，但癌癥依然是壓在廣大患者、醫生以及科研人員心頭的一塊重石。根據世界衛生組織的調查統計，癌癥是全球第二大死因，僅2015年就導致了880萬人的死亡。如果從全球死亡統計看，將近六分之一的死亡都由癌癥引起。對于早期患者，傳統的治療手段有如手術切除，化療以及放射性治療等，但這些手段在治療的同時也在一定程度上給患者帶來了較大的副作用以及并不能完全根除的弊端。因此研究新型的精準高效的治療癌癥的方法極其重要和緊急。

多肽類藥物因其在體的低毒性和明確的靶向性逐漸成為抗腫瘤研究的熱點。多肽不僅能夠作為多種藥物的載體提高小分子藥物的生物相容性，同時特定序列的多肽也可被賦予抗腫瘤活性。正電性的穿膜肽，能夠與電負性的磷脂雙分子層作用，并進入細胞引起細胞的凋亡，從而達到治療腫瘤的目的。然而，穿膜肽在體內易被內源性蛋白酶降解，因此提高穿膜肽在體內的穩定性和滯留率成為了提高其抗腫瘤活性的研究熱點。本發明通過將具有光動力活性的卟啉類衍生物和兩親性的穿膜肽耦合，設計了一種新型抗腫瘤卟啉多肽軛合物，通過實驗與計算方法研究了卟啉對于穿膜肽在體內滯留率的影響以及抗腫瘤作用研究。

發明內容

本發明的目的在于針對現有穿膜肽存在的問題，提供一種卟啉修飾的穿膜肽及其制備和應用。本發明的卟啉修飾的穿膜肽不僅能夠通過卟啉延長穿膜肽在體內的滯留時長，還能通過卟啉作為光敏劑的特性引入光動力治療，從而增強對腫瘤的殺傷能力。本發明合成的卟啉多肽衍生物生物相容性好，體內滯留率長，同時還能達到提供體內成像和治療的目的，其化合物結構單一，不存在異構體，產品容易提純；合成方法比較簡單，副反應少，產率較高，原料易得，成本低，有利于工業化生產。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種卟啉修飾的穿膜肽PPA-K6L9包含一分子卟啉與一分子含有2個甘氨酸、6個賴氨酸和9個亮氨酸構成的多肽分子通過酰胺鍵共價連接，其化學結構式為：

一種卟啉修飾的穿膜肽PPA-K6L9的制備方法，包括以下步驟：一分子單羧基的卟啉衍生物焦脫鎂葉綠素a與一分子由17個氨基酸組成的穿膜肽通過酰胺鍵共價連接；

所述單羧基的卟啉衍生物焦脫鎂葉綠素a，其化學結構為：

，

所述由17個氨基酸組成的N端暴露，C端接有樹脂的GGK6L9穿膜肽，其化學結構為：

；

合成的卟啉修飾的穿膜肽PPA-K6L9，其化學結構為：

。

一種卟啉修飾的穿膜肽PPA-K6L9的制備方法，具體包括以下步驟：

（1）將0.0215 mmol焦脫鎂葉綠素a , 0.0633 mmol,苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鹽（HBTU） 加入至2 mL N,N-二甲基甲酰胺（DMF）中，然后再加入93.3 μL的N,N-二異丙基乙胺（DIEA），室溫下攪拌30 min；