[發(fā)明專利]一種心肌肌鈣蛋白的檢測方法

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• 申請日: 2019-12-07
• 公開（公告）號: CN110736844A
• 公開（公告）日: 2020-01-31
• 發(fā)明（設計）人: 許行尚;杰弗瑞·陳;于沛
• 申請（專利權）人: 南京嵐煜生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 32243 南京正聯(lián)知識產權代理有限公司
• 代理人: 顧伯興

本發(fā)明公開了一種心肌肌鈣蛋白的檢測方法，具體包括以下步驟：(1)用移液器從加液口加入定量的樣本；(2)樣本經微流道流入反應腔，微流體芯片與混沌對流混勻裝置為一體化設計，啟動混勻，混勻3～15min，樣本抗原與反應腔內的抗體進行免疫反應，停止混沌對流混勻裝置；(3)采用移液器向加液口中推入空氣推動微流體芯片中的液體向前移動吹干反應腔和流道；(4)再向加液口加入清洗液至充滿反應腔，再次啟動混沌對流混勻裝置，混勻1～3min，進行清洗，停止混沌對流混勻裝置，移液器向微流體芯片推入空氣吹干微流道和反應腔；(5)重復步驟(4)再清洗3～5次；(6)將微流體芯片進行熒光檢測，獲得反應熒光值。

技術領域

本發(fā)明屬于醫(yī)療設備技術領域，尤其是涉及一種心肌肌鈣蛋白的檢測方法。

背景技術

微流體學是跨包括工程學、物理學、化學、微技術和生物技術的各種學科來應用的技術。微流體學涉及到對微量流體的研究以及對如何在諸如微流體檢測芯片之類的各種微流體系統(tǒng)和設備中操縱、控制和使用這樣的少量流體的研究。例如：微流體生物芯片(被稱為“芯片實驗室”)在分子生物學領域中用于整合化驗操作，以用于諸如分析酶和DNA，檢測生物化學毒素和病原體、診斷疾病等目的。

微流體檢測芯片(microfluidic chip)是當前微全分析系統(tǒng)(MiniaturizedTotal Analysis Systems)發(fā)展的熱點領域。微流體檢測芯片分析以芯片為操作平臺，同時以分析化學為基礎，以微機電加工技術為依托，以微管道網絡為結構特征，以生命科學為目前主要應用對象，是當前微全分析系統(tǒng)領域發(fā)展的重點。它的目標是把整個化驗室的功能，包括采樣、稀釋、加試劑、反應、分離、檢測等集成在微芯片上。微流體檢測芯片是微流體技術實現的主要平臺。其裝置特征主要是其容納流體的有效結構(通道、腔室和其它某些功能部件)至少在一個緯度上為微米級尺度。由于微米級的結構，流體在其中顯示和產生了與宏觀尺度不同的特殊性能。因此發(fā)展出獨特的分析產生的性能。微流體檢測芯片的特點及發(fā)展優(yōu)勢：微流體檢測芯片具有液體流動可控、消耗試樣和試劑極少、分析速度成十倍上百倍地提高等特點，它可以在幾分鐘甚至更短的時間內進行上百個樣品的同時分析，并且可以在線實現樣品的預處理及分析全過程。其產生的應用目的是實現微全分析系統(tǒng)的終極目標－芯片實驗室，目前工作發(fā)展的重點應用領域是生命科學領域。

但目前對于利用微流體芯片進行檢測時，在微流體芯片的密閉狹小的反應腔中，如何提高樣本的混勻效果是急需解決的問題，此前有采用磁珠混勻的方式，與傳統(tǒng)的分離方法相比，把磁珠用于生化樣品復雜組分的的分離，能夠實現分離和富集的同時進行，有效地提高了分離速度和富集效率，同時也使分析檢測的靈敏度大大提升。通過在磁珠表面包被上特異性抗體、受體等，可以用于分離純化樣品中的靶體。尤其在體外診斷免疫檢測中，通常需要對反應體系進行混勻，使反應更加充分；但經過大量實驗證明，采用磁珠混勻的混勻效果仍有待進一步提高。

因此，有必要開發(fā)一種心肌肌鈣蛋白的檢測方法，混勻效率高，檢測結果準確率高，且能降低成本，操作更簡便。

發(fā)明內容

本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種采用微流體芯片檢測心肌肌鈣蛋白的方法，免疫反應混勻效率高，結果準確率高，且能降低成本，操作更簡便。

為解決上述技術問題，本發(fā)明采用的技術方案是，該微流體芯片檢測心肌肌鈣蛋白的方法，具體包括以下步驟：

(1)用移液器從加液口加入定量的樣本血漿/血清；

(2)所述樣本血漿/血清依次通過中層加液通孔、加液輸入微流道、反應腔輸入流道流入反應腔，微流體芯片與混沌對流混勻裝置為一體化設計，啟動所述混沌對流混勻裝置對所述反應腔內的所述樣本血漿/血清混勻，混勻3～15min，樣本抗原與所述反應腔內的抗體進行免疫反應，停止所述混沌對流混勻裝置；

(3)采用所述移液器向加液口中推入空氣，推動微流體芯片中的液體向前移動，吹干反應腔和流道；