[發(fā)明專利]一種心肌肌鈣蛋白的檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911246006.6
• 申請(qǐng)日: 2019-12-07
• 公開（公告）號(hào): CN110736844A
• 公開（公告）日: 2020-01-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許行尚;杰弗瑞·陳;于沛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京嵐煜生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 32243 南京正聯(lián)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 顧伯興

1.一種使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

(1)用移液器從加液口加入定量的樣本血漿/血清；

(2)所述樣本血漿/血清依次通過(guò)中層加液通孔、加液輸入微流道、反應(yīng)腔輸入流道流入反應(yīng)腔，微流體芯片與混沌對(duì)流混勻裝置為一體化設(shè)計(jì)，啟動(dòng)所述混沌對(duì)流混勻裝置對(duì)所述反應(yīng)腔內(nèi)的所述樣本血漿/血清混勻，混勻3～15min，樣本抗原與所述反應(yīng)腔內(nèi)的抗體進(jìn)行免疫反應(yīng)，停止所述混沌對(duì)流混勻裝置；

(3)采用所述移液器向加液口中推入空氣，推動(dòng)微流體芯片中的液體向前移動(dòng)，吹干反應(yīng)腔和流道；

(4)再向所述加液口加入清洗液，至充滿所述反應(yīng)腔，再次啟動(dòng)所述混沌對(duì)流混勻裝置，混勻1～3min，進(jìn)行清洗，停止混沌對(duì)流混勻裝置，移液器向微流體芯片推入空氣吹干芯片微流道和反應(yīng)腔；

(5)重復(fù)步驟(4)再清洗3～5次；

(6)將所述微流體芯片進(jìn)行熒光檢測(cè)，獲得反應(yīng)熒光值。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，該檢測(cè)心肌肌鈣蛋白所使用的微流體芯片，包括芯片本體，所述芯片本體從下往上依次包括下層芯片、中層芯片和上層芯片；所述芯片本體包括加液口、反應(yīng)腔和微流道，其特征在于，所述中層芯片與上層芯片相配合界定出封閉的微流道和反應(yīng)腔；所述加液口通過(guò)所述微流道與所述反應(yīng)腔相連通；所述反應(yīng)腔內(nèi)設(shè)有至少一個(gè)凹槽。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，所述微流體芯片的底部設(shè)有混沌對(duì)流混勻裝置。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，所述反應(yīng)腔包括設(shè)置在所述中層芯片的背面的上反應(yīng)腔室和貫穿設(shè)置在所述下層芯片的下反應(yīng)腔室，所述上反應(yīng)腔室在所述中層芯片的背面的位置與所述下反應(yīng)腔室在所述下層芯片的位置相對(duì)應(yīng)設(shè)置；所述下反應(yīng)腔室的底部由彈性薄膜覆蓋在所述下層芯片的背面密封，所述凹槽設(shè)置在所述上反應(yīng)腔室。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微流體芯片，其特征在于，所述凹槽為向內(nèi)凹陷的圓槽，所述凹槽的數(shù)量為3個(gè)，3個(gè)所述凹槽在所述反應(yīng)腔中均勻分布。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，所述微流道包括反應(yīng)腔輸入流道和反應(yīng)腔輸出流道，所述反應(yīng)腔輸入流道和反應(yīng)腔輸出流道均設(shè)置在所述中層芯片的背面，所述反應(yīng)腔輸入流道與所述上反應(yīng)腔室的一端相連通，所述反應(yīng)腔輸出流道與所述上反應(yīng)腔室的另一端相連通；所述反應(yīng)腔輸入流道與所述加液口相連通；所述反應(yīng)腔輸入流道與所述加液口之間設(shè)有防回流結(jié)構(gòu)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，所述上層芯片上貫穿設(shè)有所述加液口，所述中層芯片在所述加液口的相應(yīng)位置貫穿設(shè)有中層加液通孔，所述下層芯片的正面在所述加液口的相應(yīng)位置處設(shè)有加液輸入微流道；所述加液輸入微流道通過(guò)中層加液通孔與所述加液口相連通，所述反應(yīng)腔輸入流道通過(guò)加液輸入微流道與所述加液口相連通。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，所述防回流結(jié)構(gòu)包括豎向流道一、豎向流道二和防回流連接流道；所述防回流連接流道設(shè)置在所述上層芯片的背面，所述豎向流道一和所述豎向流道二均貫穿設(shè)置在所述中層芯片上；所述加液輸入微流道依次經(jīng)過(guò)豎向流道二、防回流連接流道和豎向流道一后與所述反應(yīng)腔輸入流道相連通。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的使用微流體芯片檢測(cè)心肌肌鈣蛋白的方法，其特征在于，所述芯片本體還包括廢液腔，所述廢液腔設(shè)置在所述下層芯片上，所述中層芯片上在與所述廢液腔相對(duì)應(yīng)的位置上貫穿設(shè)有中層廢液腔通孔；所述上層芯片的背面在與所述廢液腔相對(duì)應(yīng)的位置上設(shè)有廢液腔蓋板，相應(yīng)地，所述上層芯片貫穿設(shè)有廢液腔排氣孔，所述中層芯片的正面在所述廢液腔的上部設(shè)有附屬防漏廢液腔，且所述附屬防漏廢液腔在與所述廢液腔排氣孔相對(duì)應(yīng)的位置貫穿設(shè)有廢液腔中層排氣孔。