[發明專利]一種從金盞花中提取花青素和多酚的方法

有效

• 申請號: 201911238002.3
• 申請日: 2019-12-06
• 公開（公告）號: CN110755466B
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 黃榮;梁琳;劉燕
• 申請（專利權）人: 成都師范學院
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;A61K36/28;G01N21/31;G01N21/3577
• 代理公司: 鄭州芝麻知識產權代理事務所(普通合伙) 41173
• 代理人: 郭尊言

1.一種從金盞花中提取花青素和多酚的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、樣品處理 取金盞花干花，于60℃烘干，粉碎過60目；

S2、金盞花花青素的提取和含量測定，包括以下步驟：

（a）將粉碎后的金盞花粉末按1∶70g/mL的料液比加入40mg/mL的表面活性劑月桂酰肌氨酸鈉的pH=1.00的酸性70%乙醇溶液中，用微波提取，參數設置：微波功率400W，溫度60℃，提取時間5min，離心，抽濾，濃縮蒸發將乙醇去除，冷凍干燥后得到金盞花花青素；

（b）pH示差法測定花青素的含量：測量時量取1mL提取液，分別用pH=1.00和pH=4.50的緩沖液定容至10mL，反應2h后離心，以蒸餾水為參比分別在波長為510nm和700nm下測吸光值，結合朗伯比爾定律可以得出，在兩個不同的pH下，花青素溶液的吸光值的差值與花青素的含量成比例，再結合FulekiT的經驗公式計算出花青素的含量；

S3、金盞花多酚的提取和含量測定，包括以下步驟：

（a）將粉碎后的金盞花粉末按1∶35g/mL的料液比加入0.02mg/mL的表面活性劑月桂醇聚醚磷酸鉀的50%乙醇溶液中，用微波提取，參數設置微波功率400W，溫度60℃，提取時間4min，離心，抽濾，濃縮蒸發將乙醇去除，冷凍干燥后得到金盞花金盞花多酚；

（b）標準曲線的繪制和樣品測定：準確稱取0.25g沒食子酸標準品，加水定容至25mL，移取沒食子酸標準儲備液1mL，加水定容至100mL，儲備液備用，分別移取0.0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0mL沒食子酸標準溶液于25mL容量瓶中，加入1mL福林酚試劑，搖勻后加入8mL質量分數為20%的Na₂CO₃溶液，加水定容至刻度線，將其搖勻，放在室溫避光的條件下靜置2h，在762nm處測定吸光度，以吸光度A為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線，進行線性回歸分析，得回歸方程；

樣品測定：精密量取供試品，加水溶解，加入1mL福林酚試劑，搖勻后加入8mL質量分數為20%的Na₂CO₃溶液，加水定容到25.0mL，于室溫避光條件下反應2h，在762nm處測定吸光度，根據標準曲線中吸光度對應的濃度計算出金盞花多酚含量；

在步驟S2中，所述FulekiT的經驗公式為：

（mg/100g）=(A/ε×L)×M_W×DF×V/Wt?100公式（1）

ε：摩爾吸光系數（取值26900）；

M_W：摩爾質量（g/mol以矢車菊-3-葡萄糖苷計，取值為449.2）；

DF：樣品稀釋因子（稀釋倍數）；

L：光程（cm）；

Wt：產品重量（g）；

V：最終定容體積（mL）；

A：最終吸光度，A=(A₅₁₀-A₇₀₀)pH_1.00-(A₅₁₀-A₇₀₀)pH_4.50；

在步驟S3中，所述回歸方程Y=0.0962X+0.0617。

2.根據權利要求1所述的一種從金盞花中提取花青素和多酚的方法，其特征在于，在步驟S2中，pH=4.50緩沖液的制備：準確稱取NaAc1.64g，用蒸餾水定容至100mL，用鹽酸調pH，調至pH=4.5±0.1。

3.根據權利要求1所述的一種從金盞花中提取花青素和多酚的方法，其特征在于，在步驟S2中，pH=1.00緩沖液的制備：準確稱取KCl1.49g，用蒸餾水定容至100mL，準確量取1.7mL鹽酸用蒸餾水定容至100mL，配成0.2mol/LHCl溶液，將KCl溶液與HCl溶液以25：67的比例混合，用KCl溶液調pH，調至pH=(1.0±0.1)。