[發明專利]用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條及其制備與檢測方法

在審

• 申請號: 201911236705.2
• 申請日: 2019-12-05
• 公開（公告）號: CN112924686A
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 李富友;徐明;陳銳
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N21/78
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 趙徐平

1.用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條，其特征在于：包括底板；所述底板的頂部設有依次相連的樣品區、檢測區與吸附區；

所述檢測區設有測試線與質控線；所述樣品區設有用于檢測血清淀粉樣蛋白A的探針；所述探針由有機長余輝發光材料與檢測抗體或核酸適配體組成；所述檢測抗體或核酸適配體能與血清淀粉樣蛋白A特異性結合；

所述樣品區設有樣品上樣位；所述探針位于靠近所述檢測區一側，所述樣品上樣位設于遠離所述檢測區一側。

2.根據權利要求1所述的用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條，其特征在于：所述免疫層析試紙條的檢測線性范圍為0.5～500μg/mL。

3.根據權利要求1所述的用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條，其特征在于：所述樣品區設有樣品墊；所述檢測區設有NC膜；所述吸附區設有吸水紙；所述NC膜設于底板的中部，所述樣品墊與所述吸水紙分別搭設于所述NC膜的兩側；所述測試線與所述質控線平行設置于所述NC膜上，所述質控線相較于所述測試線更靠近所述吸水紙；所述樣品墊上設有探針上樣線，用于檢測血清淀粉樣蛋白A的所述探針上樣于所述探針上樣線處。

4.根據權利要求1所述的用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條，其特征在于：所述有機長余輝發光材料與所述檢測抗體或核酸適配體通過羧基-氨基、醛基-氨基或巰基-馬來酰胺生物偶聯；所述檢測抗體為SAA-Ab₁型單克隆抗體；所述測試線包被有SAA-Ab₂型單克隆抗體；所述質控線包被有二抗。

5.根據權利要求1所述的用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條，其特征在于：所述有機長余輝發光材料包括吸光劑、光化學緩存劑、發光劑與納米載體介質；所述光化學緩存劑經過加成、重排或斷鍵反應步驟，于吸光劑與發光劑之間進行能量儲存和能量交換；所述納米載體介質用于負載所述吸光劑、所述光化學緩存劑與所述發光劑。

6.根據權利要求5所述的用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條，其特征在于，所述光化學緩存劑由以下物質組成：

其中，

G和T分別為O,S,Se和N中的任意一種；

R₁′、R₂′、R₄′至R₈′分別選自以下基團中的任意一種：H、羥基、羧基、氨基、巰基、酯基、硝基、磺酸基、鹵素、酰胺基，具有1-50個碳原子的烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷氨基、芳基、芳烷基，具有N、O或S的雜芳基或雜芳烷基，其中所述芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基具有取代基L；

L為羥基、羧基、氨基、巰基、酯基、硝基、磺酸基、鹵素、酰胺基，或具有1-50個碳原子的烷基、烯基、炔基、烷氧基和烷氨基中的一種；

R₃′為吸電子基團或包含吸電子基團的芳基；所述吸電子基團選自硝基、鹵素、鹵代烷基、磺酸基、氰基、?；?、羧基中的一種；

所述發光劑為銥配合物、稀土配合物、并苯類化合物、氟硼二吡咯類化合物，以及其衍生物或共聚物中的至少一種；

所述吸光劑為卟啉類染料、酞菁類染料、過渡金屬配合物、量子點，以及其衍生物或共聚物中的至少一種；

所述納米載體介質為聚苯乙烯微球。

7.根據權利要求6所述的用于檢測血清淀粉樣蛋白A的免疫層析試紙條，其特征在于：所述吸光劑與所述發光劑的摩爾比為1:2～10000；所述光化學緩存劑的質量為所述吸光劑、所述光化學緩存劑與所述發光劑總質量的0.1％～80％；所述檢測抗體或核酸適配體的質量為所述探針總質量的1％～20％；所述聚苯乙烯微球為表面含有羧基的聚苯乙烯納米微球，粒徑為5nm～1000nm。