[發明專利]一種土貝母藥材UPLC特征圖譜的構建方法及其成分含量測定方法

有效

• 申請號: 201911222672.6
• 申請日: 2019-12-03
• 公開（公告）號: CN111007190B
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 黃敏燁;李振雨;童培珍;曹斯瓊;潘禮業;孫冬梅;陳向東;魏梅;程學仁
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 廣州一銳專利代理有限公司 44369
• 代理人: 楊昕昕;董云

1.一種土貝母藥材UPLC特征圖譜的構建方法，其特征在于，包含如下步驟：

（1）精密稱取土貝母藥材粉末，制備得到土貝母藥材供試品溶液；

（2）將土貝母藥材供試品溶液采用超高效液相色譜儀分析，得到土貝母藥材UPLC特征圖譜；

所述超高效液相色譜儀分析的色譜條件為：采用規格為2 .1× 100mm，1 .6μm的Waters Cortecs T3色譜柱，以乙腈為流動相A，以0 .05~0 .15%的磷酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫，柱溫為20~40℃；流速為0.2~0.4ml/min；檢測波長為180~220nm，進樣量為0.5~1 .5μl；

所述梯度洗脫條件為：0~4min，流動相A的體積分數變化為5%~11%，流動相B的體積分數為95%~89%；4~7min，流動相A的體積分數變化為11%~20%，流動相B的體積分數變化為89%~80%；7~21min，流動相A的體積分數變化為20%~28%，流動相B的體積分數變化為80%~72%；21~30min，流動相A的體積分數變化為28%~32%，流動相B的體積分數變化為72%~68%；30~33min，流動相A的體積分數變化為32%~35%，流動相B的體積分數變化為68%~65%；33~38min，流動相A的體積分數為35%，流動相B的體積分數為65%。

2.根據權利要求1所述的土貝母藥材UPLC特征圖譜的構建方法，其特征在于，所述的供試品溶液的制備方法為：取土貝母藥材粉末0 .4~0 .6g，精密稱定，精密加入40~60%乙醇20~30ml，稱定重量，超聲處理20~40分鐘，放冷，再稱定重量，用40~60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

3.一種土貝母藥材的成分含量測定方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）分別吸取對照品溶液和待測土貝母藥材樣品溶液注入超高效液相色譜儀，測定相應峰面積；

（2）通過外標法計算土貝母苷甲的含量；

（3）再通過一測多評法計算土貝母苷乙、土貝母苷丙的含量；

所述超高效液相色譜儀分析的色譜條件為:采用規格為2.1× 100mm，1 .6μm的WatersCortecs T3色譜柱，以乙腈為流動相A，以0 .05~0 .15%的磷酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫，柱溫為20~40℃；流速為0.2~0.4ml/min；檢測波長為180~220nm，進樣量為0.5~1 .5μl；

所述梯度洗脫條件為：0~4min，流動相A的體積分數變化為5%~11%，流動相B的體積分數為95%~89%；4~7min，流動相A的體積分數變化為11%~20%，流動相B的體積分數變化為89%~80%；7~21min，流動相A的體積分數變化為20%~28%，流動相B的體積分數變化為80%~72%；21~30min，流動相A的體積分數變化為28%~32%，流動相B的體積分數變化為72%~68%；30~33min，流動相A的體積分數變化為32%~35%，流動相B的體積分數變化為68%~65%；33~38min，流動相A的體積分數為35%，流動相B的體積分數為65%。

4.根據權利要求3所述的土貝母藥材的成分含量測定方法，其特征在于，所述對照品溶液的制備方法為：取土貝母苷甲、土貝母苷乙及土貝母苷丙對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含土貝母苷甲80~120μg、土貝母苷乙40~60μg、土貝母苷丙60~100μg的對照品溶液。

5.根據權利要求3所述的土貝母藥材的成分含量測定方法，其特征在于，所述待測土貝母藥材樣品溶液的制備方法為：取土貝母藥材粉末0 .4~0 .6g，精密稱定，精密加入40~60%乙醇20~30ml，稱定重量，超聲處理20~40分鐘，放冷，再稱定重量，用40~60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

6.權利要求1~5任一所述的土貝母藥材UPLC特征圖譜的構建方法或土貝母藥材的成分含量測定方法在檢測和鑒別土貝母藥材中的應用。