[發(fā)明專利]一種PT141合成方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911214258.0
• 申請(qǐng)日: 2019-12-02
• 公開（公告）號(hào): CN110724188B
• 公開（公告）日: 2021-10-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭春旭;孔亞;顧維煒;黃保勝;周黎;王良友
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州天馬醫(yī)藥集團(tuán)天吉生物制藥有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/685
• 分類號(hào): C07K14/685;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/16
• 代理公司: 蘇州睿昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32277
• 代理人: 馬小慧

1.一種PT141合成方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)以Rink HMBA-Am Resin和Fmoc-Lys(Boc)-OH為原料，制備Fmoc-Lys(Boc)-HMBA-AmResin；

(2)在步驟(1)制得的Fmoc-Lys(Boc)-HMBA-Am Resin上通過Fmoc固相合成法依次偶聯(lián)保護(hù)基氨基酸，得到線性PT141全保護(hù)肽樹脂；

(3)將步驟(2)制得的線性PT141全保護(hù)肽樹脂用裂解液裂解脫除氨基酸保護(hù)基，對(duì)所得產(chǎn)物進(jìn)行環(huán)化處理，使得肽鏈在2位的Asp處與7位Lys處成環(huán)；

(4)對(duì)步驟(3)所得環(huán)化產(chǎn)物進(jìn)行甲酯化脫除HMBA-Am Resin殘基，而后將產(chǎn)物水解，經(jīng)過純化，冷凍干燥得PT141。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，脫Fmoc使用的試劑為15-25％的哌啶/DMF。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(3)中，所述的裂解液包括85-95％三氟乙酸、4-6％苯甲硫醚、1-3％苯甲醚和2-4％1,2-乙二硫醇。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述的裂解液的添加量為6-10ml/g線性PT141全保護(hù)肽樹脂，裂解時(shí)間為1-3h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(3)中，裂解后還包括采用DCM洗滌2-4遍，DMF洗滌5-7遍的步驟。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(3)中，環(huán)化過程是在載體樹脂上進(jìn)行的，采用的縮合劑為HOBt、PyBoP或DIEA。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(4)中，甲酯化所用的試劑為DIEA、MeOH和DMF按照1：1-3：4-6體積比配制而成。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(4)中，水解是采用30-200mg/L的NaOH將溶液調(diào)節(jié)至堿性進(jìn)行水解反應(yīng)去除甲酯。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(4)中，所述的純化是采用高效液相色譜進(jìn)行純化，條件為：純化：流動(dòng)相：A相：0.5-1.5‰TFA；B相：乙腈；轉(zhuǎn)鹽：流動(dòng)相：A相：1)40-60mmol/L的NH₄Ac水溶液，2)0.3-0.5‰醋酸；B相：乙腈。