[發(fā)明專利]包含白芨提取物的牙膏止血性能體外評(píng)價(jià)模型和方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911213370.2
• 申請(qǐng)日: 2019-12-02
• 公開（公告）號(hào): CN110849835A
• 公開（公告）日: 2020-02-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳文惠;郭慶;馮婧文;包斌;郭銳華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/31
• 分類號(hào): G01N21/31;G01N1/28
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31227
• 代理人: 周一新

1.包含白芨提取物的牙膏止血性能體外評(píng)價(jià)模型，其特征在于，其評(píng)價(jià)指標(biāo)包括血小板聚集率、環(huán)磷酸腺苷(cAMP)和血栓素B₂(TXB₂)中至少一種；

所述體外評(píng)價(jià)模型的構(gòu)建方法包含以下步驟：

(ⅰ)采集動(dòng)物動(dòng)脈血，離心，提取血小板密度為1×10¹²/L的血漿置于96孔板內(nèi)，檢測其空白時(shí)的吸光度OD₀；

(ⅱ)將包含不同濃度白芨提取物的牙膏樣品和對(duì)照樣品分別加入到步驟(ⅰ)的孔板內(nèi)，輕微震蕩，于37℃恒溫孵育至充分反應(yīng)；和

(ⅲ)加入5uL的10uM二磷酸腺苷(ADP)溶液，輕微震蕩，誘導(dǎo)血小板聚集反應(yīng)；

(ⅳ)待上述反應(yīng)體系內(nèi)濁度發(fā)生變化時(shí)，測試加入不同樣品的血漿經(jīng)步驟(ⅲ)血小板聚集反應(yīng)后的吸光度OD_t、cAMP和TXB₂含量，按照如式(1)計(jì)算血小板聚集率：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外評(píng)價(jià)模型，其特征在于，所述動(dòng)物為雌性新西蘭大白兔，且其血漿提取方法為：采集大白兔動(dòng)脈血，22℃下900rpm離心8min，將離心后的上層液體緩慢轉(zhuǎn)移，得到富血小板血漿；余下部分用3000rpm離心10min，取上清，得到貧血小板血漿，并調(diào)整血小板密度為1×10¹²/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外評(píng)價(jià)模型，其特征在于，還包括通過動(dòng)物模型驗(yàn)證所述體外評(píng)價(jià)模型一致性的步驟。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外評(píng)價(jià)模型，其特征在于，所述牙膏內(nèi)白芨提取物的濃度為0.05～0.80重量％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的體外評(píng)價(jià)模型，其特征在于，所述牙膏內(nèi)白芨提取物的濃度為0.10～0.40重量％。

6.權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述體外評(píng)價(jià)模型用于評(píng)價(jià)包含白芨提取物的牙膏止血性能的方法，其特征在于，通過權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述體外評(píng)價(jià)模型獲得所述牙膏樣品和對(duì)照樣品血漿中血小板聚集率、cAMP和TXB₂含量，并根據(jù)其含量變化評(píng)價(jià)所述包含白芨提取物的牙膏止血性能。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述評(píng)價(jià)包含白芨提取物的牙膏止血性能的方法，其特征在于，血小板聚集率升高，所述牙膏止血性能好；和/或

TXB₂含量升高，所述牙膏止血性能好；和/或

cAMP含量降低，所述牙膏止血性能好。