[發明專利]一種1,5-脫水葡萄糖醇的唾液無創檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 201911207125.0
• 申請日: 2019-11-29
• 公開（公告）號: CN110988165B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 包玉倩;賈偉;趙愛華;周健;馬曉靜;王煜非;菅朝慧
• 申請（專利權）人: 上海市第六人民醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 郎祺

1.一種1,5-脫水葡萄糖醇的唾液無創檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一，用唾液采集管收集測試個體的唾液樣本；

步驟二，將步驟一所采集的唾液樣本與乙腈、甲醇溶液混合后預處理；

步驟三，將預處理后的樣本進行液相色譜質譜聯用分析；

所述液相色譜采用氨基柱或Hilic柱，流動相A是0.05％的氨水溶液，流動相B由含0.05％氨水的乙腈：異丙醇的水溶液組成，其中乙腈：異丙醇：水的體積比為95:5:5；

所述步驟三中的液相色譜聯用分析的步驟如下：

(1)梯度洗脫1～2分鐘時，保持A相80％，B相20％；

(2)2.5分鐘時，A相從80％降低到50％，B相由20％升至50％，并保持到4分鐘；

(3)4.1分鐘時，A相回到100％，平衡2分鐘后重新進樣。

2.根據權利要求1所述的1,5-脫水葡萄糖醇的唾液無創檢測方法，其特征在于，步驟一中，所述唾液樣本的具體采集方法為：采集前至少30分鐘刷牙或漱口，保持口腔無刺激時間≥30分鐘，咀嚼唾液采集管匹配的棉棒。

3.根據權利要求2所述的1,5-脫水葡萄糖醇的唾液無創檢測方法，其特征在于，咀嚼所述唾液采集管匹配的棉棒的時間為1分鐘，咀嚼次數為40～50次。

4.根據權利要求1所述的1,5-脫水葡萄糖醇的唾液無創檢測方法，其特征在于，步驟二中，所述乙腈、甲醇溶液中乙腈和甲醇的體積比為8：2。

5.根據權利要求1所述的1,5-脫水葡萄糖醇的唾液無創檢測方法，其特征在于，步驟二中，所述預處理的操作過程為：混合后的溶液渦旋3-8分鐘后，于-20℃冷凍，離心，取上清液待進樣測試。

6.根據權利要求1所述的1,5-脫水葡萄糖醇的唾液無創檢測方法，其特征在于，所述質譜采用負離子模式，毛細管電壓為2.0KV，脫氣溫度為500℃，脫溶劑氣流速為1000L/Hr，錐孔反吹氣流流速為50L/Hr，碰撞氣流速為0.15mL/分鐘。