[發(fā)明專(zhuān)利]脂多糖在建立人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911203224.1
• 申請(qǐng)日: 2019-11-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110862957A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-03-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李樂(lè);張艷云;盧永波
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣東博溪生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/077
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/077;C12Q1/02
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.脂多糖在建立人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，脂多糖在建立人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型中的應(yīng)用過(guò)程為：

將人牙齦成纖維細(xì)胞接種于多孔板中，加入培養(yǎng)液，置于37±1℃、5±1%CO₂、95%相對(duì)濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24h后棄去舊培養(yǎng)液，每孔加入含 脂多糖的培養(yǎng)液，置于37±1℃、5±1%CO₂、95%相對(duì)濕度培養(yǎng)箱中孵育4-24h，檢測(cè)細(xì)胞衰老程度。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，每孔中加入培養(yǎng)液的量為2mL，每孔加入含脂多糖的培養(yǎng)液的量為2ml，所述含脂多糖的培養(yǎng)液中脂多糖的終濃度為0.5-20μg/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述人牙齦成纖維細(xì)胞接種于多孔板中的密度為1×10⁴-2×10⁵個(gè)細(xì)胞/孔。

5.一種建立人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型的方法，其特征在于，包括以下步驟：將人牙齦成纖維細(xì)胞接種于多孔板中，加入培養(yǎng)液，置于37±1℃、5±1%CO₂、95%相對(duì)濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24h后棄去舊培養(yǎng)液，每孔加入含 脂多糖的培養(yǎng)液，置于37±1℃、5±1%CO₂、95%相對(duì)濕度培養(yǎng)箱中孵育4-24h，檢測(cè)細(xì)胞衰老程度。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，每孔中加入培養(yǎng)液的量為2mL，每孔加入含脂多糖的培養(yǎng)液的量為2ml，所述含脂多糖的培養(yǎng)液中脂多糖的終濃度為0.5-20μg/mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述人牙齦成纖維細(xì)胞接種于多孔板中的密度為1×10⁴-2×10⁵個(gè)細(xì)胞/孔。

8.人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型，其特征在于，所述人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型由以下方法制備而成：將人牙齦成纖維細(xì)胞接種于多孔板中，加入培養(yǎng)液，置于37±1℃、5±1%CO₂、95%相對(duì)濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24h后棄去舊培養(yǎng)液，每孔加入含脂多糖的培養(yǎng)液，置于37±1℃、5±1%CO₂、95%相對(duì)濕度培養(yǎng)箱中孵育4-24h，獲得所述人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型，其特征在于，每孔中加入培養(yǎng)液的量為2mL，每孔加入含脂多糖的培養(yǎng)液的量為2ml，所述含脂多糖的培養(yǎng)液中脂多糖的終濃度為0.5-20μg/mL。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的人牙齦成纖維細(xì)胞應(yīng)激衰老模型，其特征在于，所述人牙齦成纖維細(xì)胞接種于多孔板中的密度為1×10⁴-2×10⁵個(gè)細(xì)胞/孔。