[發明專利]鑒定粉擬青霉的特異性引物、試劑盒、方法及其應用在審
| 申請號： | 201911197113.4 | 申請日： | 2019-11-29 |
| 公開（公告）號： | CN112877452A | 公開（公告）日： | 2021-06-01 |
| 發明（設計）人： | 錢正明;謝美霞;鄭雅丹;李春紅;李文慶;金李玲 | 申請（專利權）人： | 東莞市東陽光冬蟲夏草研發有限公司;宜昌山城水都冬蟲夏草有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/79 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 523871 廣東省東莞市長*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 鑒定 青霉 特異性 引物 試劑盒 方法 及其 應用 | ||
1.一種鑒定粉擬青霉菌的特異性引物，其特征在于，其序列如下：
NF154：5’-CCCAAACTCTGTATTCTC-3’；
NR428：5’-GGCCGGCGGTATACAG-3’。
2.一種鑒定粉擬青霉菌的試劑盒，其特征在于，包含以下引物：
NF154：5’-CCCAAACTCTGTATTCTC-3’；
NR428：5’-GGCCGGCGGTATACAG-3’。
3.一種鑒定粉擬青霉菌的方法，其特征在于，包括使用權利要求1所述的引物或權利要求2所述的試劑盒。
4.一種鑒定粉擬青霉菌的方法，其特征在于，包括步驟：
a)提取待測樣品的基因組DNA；
b)利用權利要求1所述的引物或權利要求2所述的試劑盒對步驟a)中的基因組DNA進行PCR擴增，獲得擴增產物；
c)利用步驟b)中獲得的擴增產物鑒定所述待測樣品。
5.根據權利要求4所述的鑒定粉擬青霉菌的方法，其特征在于，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性15sec-45sec，49℃-58℃退火15sec–45sec，72℃延伸10sec，25-35個循環；72℃延伸5min；
任選的，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性30sec，52℃退火30sec，72℃延伸10sec，30個循環；72℃延伸5min；
任選的，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性15sec，52℃退火15sec，72℃延伸10sec，30個循環；72℃延伸5min；
任選的，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性20sec，52℃退火20sec，72℃延伸10sec，30個循環；72℃延伸5min；
任選的，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性35sec，52℃退火35sec，72℃延伸10sec，30個循環；72℃延伸5min；
任選的，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性45sec，52℃退火45sec，72℃延伸10sec，30個循環；72℃延伸5min；
任選的，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性30sec，52℃退火30sec，72℃延伸10sec，25個循環；72℃延伸5min；
任選的，PCR擴增條件為：94℃預變性3min；94℃變性30sec，52℃退火30sec，72℃延伸10sec，35個循環；72℃延伸5min。
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