[發明專利]一種H13N8重組流感病毒及應用

在審

• 申請號: 201911195864.2
• 申請日: 2019-11-29
• 公開（公告）號: CN110760486A
• 公開（公告）日: 2020-02-07
• 發明（設計）人: 于志君;朱彤;吳家強;陳為京;高月花
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院家禽研究所
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/85;G01N33/68;A61K39/145;A61P31/16
• 代理公司: 37221 濟南圣達知識產權代理有限公司
• 代理人: 張曉鵬

1.一種H13N8重組流感病毒，其特征在于，所述重組流感病毒以雞胚適應株PR8病毒內部基因為骨架，以H13N8亞型流感病毒的HA和NA基因為抗原；所述PR8病毒內部基因為PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因。

2.如權利要求1所述H13N8重組流感病毒，其特征在于，所述PB2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

或所述PB1基因序列如SEQ ID NO:2所示；

或所述PA基因序列如SEQ ID NO:3所示；

或所述NP基因序列如SEQ ID NO:4所示；

或所述M基因序列如SEQ ID NO:5所示；

或所述NS基因序列如SEQ ID NO:6所示；

或所述HA基因序列如SEQ ID NO:7所示；

或所述NA基因序列如SEQ ID NO8所示。

3.一種H13N8重組流感病毒的制備方法，其特征在于，將PR8病毒的PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因與H13N8的HA和NA基因共同導入宿主細胞中培養獲得所述H13N8重組流感病毒。

4.如權利要求3所述H13N8重組流感病毒的制備方法，其特征在于，所述PR8病毒的PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因與H13N8的HA和NA基因是通過含有PB2基因的重組載體、含有PB1基因的重組載體、含有PA基因的重組載體、含有NP基因的重組載體、含有M基因的重組載體、含有NS基因的重組載體、含有HA基因的重組載體、含有NA基因的重組載體共同導入宿主細胞中。

5.如權利要求4所述H13N8重組流感病毒的制備方法，其特征在于，所述重組載體的表達載體為pFluDD，所述載體由pUC18載體(Thermo Fisher Scientific公司)改造而成，具體是將CMV啟動子、鼠RNA聚合酶I終止子、人RNA聚合酶I啟動子和SV40多聚腺苷酸化信號依次插入到pUC18載體上構建獲得。

6.如權利要求3所述H13N8重組流感病毒的制備方法，其特征在于，所述宿主細胞為293T細胞、COS7細胞、MDCK細胞、VERO細胞、HL-8細胞中的一種或多種，優選為293T細胞。

7.權利要求1或2所述H13N8重組流感病毒在制備臨床檢查和/或評估流感疫苗產品中的應用。

8.如權利要求7所述H13N8重組流感病毒在制備臨床檢查和/或評估流感疫苗產品中的應用，其特征在于，所述流感疫苗為H13N8病毒疫苗。

9.一種疫苗，其特征在于，所述疫苗為權利要求1或2所述H13N8重組流感病毒的滅活制劑。

10.如權利要求9所述疫苗，其特征在于，所述疫苗中還包括凍干保護劑及穩定劑。