[發明專利]一種高效液相色譜-質譜聯用檢測三甲胺的方法

在審

• 申請號: 201911194791.5
• 申請日: 2019-11-28
• 公開（公告）號: CN111077240A
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發明（設計）人: 羅燕;徐少華;吳雯娟;丁燕玲;黃敏通;陳彤;鐘名琴
• 申請（專利權）人: 深圳市農產品質量安全檢驗檢測中心（深圳市動物疫病預防控制中心）
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 廣州正明知識產權代理事務所(普通合伙) 44572
• 代理人: 成姍

本發明提供了一種高效液相色譜?質譜聯用檢測三甲胺的方法，包括以下步驟：S01.在待測樣品中加入提取劑，在冰浴條件下超聲提取；S02.離心，分離上清液和沉淀；S03.在沉淀中加入提取劑，重復離心；S04.合并每次離心后得到的上清液，純化后經過高效液相色譜?質譜聯用檢測。利用建立的方法檢測三甲胺，通過食品中三甲胺的基質抑制率折算實際樣品中三甲胺的含量，該方法操作簡單，經濟實用，三甲胺在0～200ng/mL范圍內得到的標準曲線，線性相關性R＝0.9994，檢出限為11.2μg/kg，檢出限低(達到ppb級)，靈敏度高，可用于準確檢測食品中的三甲胺。

技術領域

本發明涉及分析檢測領域，具體涉及一種高效液相色譜-質譜聯用檢測三甲胺的方法。

技術背景

三甲胺(TMA)即trimethylamine，分子式為C₃H₉N，是最簡單的叔胺，無色有魚油臭味的氣體，溶于水，乙醇，乙醚，易燃，有毒。液體或氣體狀態的三甲胺有刺激性和腐蝕性，可導致皮膚灼傷、眼部不適、呼吸道刺激等，嚴重者可導致死亡。此外，我國未對食品中的三甲胺含量有明確規定，但已經有三甲基胺尿癥(臭魚癥)患者出現，他們無法代謝體內的三甲胺。三甲胺主要存在于禽蛋、牛奶、豆類、魚類、內臟等食品中，三甲胺的測定值常用作魚類等水產品腐敗情況的重要質量控制參數。但人們對于其他食品中三甲胺的含量并未引起關注。

我國蛋鴨年存欄1.89億只，年產鴨蛋360萬噸左右，人均約25公斤。鴨蛋是南方消費的主要禽蛋之一，由于南方常年潮濕高溫，鴨蛋容易變質。而且，當前我國鴨蛋生產面臨著總體品質不高、腥味重、鮮蛋口感差等問題。三甲胺是引起鴨蛋發生腥味的主要物質，據國內外相關研究報道，三甲胺在腸道中可被進一步氧化形成氧化三甲胺，進而成為誘導動脈粥樣化等人類心血管疾病發生的協同因子，人類食用存在一定的安全風險。

目前樣品中三甲胺的提取方法對三甲胺的提取不完全，從而影響檢測的準確性，另外測定三甲胺含量的檢測方法有很多，包括分光光度法、離子色譜法、頂空氣相色譜法和頂空氣相色譜-質譜聯用法。現有的檢測方法由于檢測限高，基本達到ppm級，檢測周期長，靈敏度低，穩定性差等局限，不利于開展對于鴨蛋中三甲胺含量的快速批量測定。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中食品中三甲胺檢測方法的檢測限高，檢測周期長，以及檢測靈敏度低、穩定性差的缺陷，提供一種高效液相色譜-質譜聯用檢測三甲胺的方法。

本發明的第一個目的是提供一種用于檢測食品中三甲胺的樣品前處理方法。

本發明的第二個目的是提供一種用于檢測食品中三甲胺的方法。

本發明的第三個目的提供上述檢測方法的應用。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現：

一種用于檢測食品中三甲胺的樣品前處理方法，包括以下步驟：

S01.將待測食品勻質，加入提取劑，并在冰浴條件下超聲；

S02.首次離心，獲得上清液和沉淀；

S03.向沉淀中加入提取劑，并在冰浴條件下超聲；

S04.再次離心，獲得再次離心后的上清液和沉淀；

S05.沉淀采用步驟S03和S04進行再提取，重復1～3次；

S06.合并每次離心后的上清液，經純化后獲得目標樣品。