[發(fā)明專利]一種巰基化透明質(zhì)酸及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911181698.0
• 申請(qǐng)日: 2019-11-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112842929A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魏健;李霞;郭學(xué)平;王成山;欒貽宏;石艷麗;耿鳳;劉愛(ài)華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華熙生物科技股份有限公司;山東華熙海御生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號(hào): A61K8/73
• 分類號(hào): A61K8/73;A61Q19/00;A61L27/20;A61L27/52;C12N5/00
• 代理公司: 濟(jì)南泉城專利商標(biāo)事務(wù)所 37218
• 代理人: 賈波

本發(fā)明公開(kāi)了一種巰基化透明質(zhì)酸及其制備方法和應(yīng)用，巰基化透明質(zhì)酸是由透明質(zhì)酸或其鹽羥基位點(diǎn)的巰基化改性而得。本發(fā)明透明質(zhì)酸或其鹽與二硫化合物進(jìn)行反應(yīng)生成透明質(zhì)酸二硫化合物，再加入還原劑使二硫鍵還原為巰基，得到巰基化透明質(zhì)酸。該巰基化透明質(zhì)酸具有巰基取代度可控、溶解快、成膠快和生物相容性好的特點(diǎn)，可應(yīng)用于護(hù)膚品、關(guān)節(jié)注射、組織填充和細(xì)胞培養(yǎng)等領(lǐng)域。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種巰基化透明質(zhì)酸及其制備方法和應(yīng)用，為透明質(zhì)酸衍生物制備技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

透明質(zhì)酸(HA)是存在于人體和動(dòng)物組織中的一種天然直鏈多糖，在人體內(nèi)主要分布在臍帶、關(guān)節(jié)、眼玻璃體、皮膚等部位，發(fā)揮重要生理功能。透明質(zhì)酸具有良好的保水性、潤(rùn)滑性、黏彈性、生物降解性及優(yōu)異的生物相容性，在化妝品、醫(yī)藥(骨科、眼科、整形外科、皮膚科、胃腸科等)和功能性食品中應(yīng)用十分廣泛，并逐漸擴(kuò)展至新的應(yīng)用領(lǐng)域。

為了抵抗透明質(zhì)酸酶的降解作用和延長(zhǎng)透明質(zhì)酸在體內(nèi)的生理作用，通常將透明質(zhì)酸進(jìn)行交聯(lián)，如使用BDDE、DVS等交聯(lián)劑制備交聯(lián)透明質(zhì)酸，其凝膠形式常應(yīng)用于注射美容填充、藥物緩釋載體和組織工程等領(lǐng)域。形成凝膠后交聯(lián)劑的去除比較困難，該類交聯(lián)劑具有較大的毒性，會(huì)引起組織發(fā)炎等副作用，故交聯(lián)劑的殘留是影響該類交聯(lián)透明質(zhì)酸安全性的重要因素。巰基是一種在生物體內(nèi)天然存在、具有良好生物相容性以及還原能力很強(qiáng)的化學(xué)鍵，可通過(guò)簡(jiǎn)單氧化得到穩(wěn)定的二硫鍵。將巰基與透明質(zhì)酸進(jìn)行接枝得到生物相容性良好的巰基化透明質(zhì)酸，在溶液狀態(tài)下進(jìn)行純化，原料的去除相對(duì)比較徹底，雜質(zhì)殘留也會(huì)更低，配制為合適濃度后經(jīng)過(guò)氧化即可原位交聯(lián)成膠，無(wú)須外加交聯(lián)劑，避免了目前交聯(lián)劑殘留帶來(lái)的安全性問(wèn)題。

目前對(duì)巰基化透明質(zhì)酸的研究主要集中在透明質(zhì)酸的羧基位進(jìn)行取代制備巰基化透明質(zhì)酸，也有一些專利的報(bào)道，例如，專利CN101367884A公開(kāi)了一種半胱胺修飾的巰基化透明質(zhì)酸(HA-SH)的制備方法，該方法通過(guò)半胱氨酸的氨基與透明質(zhì)酸的羧基形成酰胺鍵，通過(guò)調(diào)節(jié)反應(yīng)配比獲得不同巰基含量的巰基化透明質(zhì)酸。專利CN101338036B公開(kāi)了一種巰基化透明質(zhì)酸的制備方法，該方法將透明質(zhì)酸側(cè)鏈羧基在碳化二亞胺活化下與含有二硫鍵的二氨或二酰肼反應(yīng)形成中間產(chǎn)物，使用二硫蘇糖醇把二硫鍵還原為巰基得到巰基化透明質(zhì)酸。該類巰基化透明質(zhì)酸都是通過(guò)不同的方式在透明質(zhì)酸的羧基位點(diǎn)上連接上巰基，親水性的羧基被部分取代后，得到的巰基化透明質(zhì)酸的水溶性和溶解速度均變差。

專利CN101511875A公開(kāi)了一種透明質(zhì)酸羥基位上巰基取代制備巰基化大分子的方法，該方法將透明質(zhì)酸與硫化乙烯反應(yīng)生成通過(guò)醚鍵連接的巰基化透明質(zhì)酸。

CN103910886A公開(kāi)了一種半胱氨酸功能化的透明質(zhì)酸結(jié)合物及其合成方法以及在可注射原位形成的水凝膠中的應(yīng)用，該方法通過(guò)對(duì)氨基進(jìn)行保護(hù)后合成了含硫和環(huán)氧乙烷的聚乙二醇類化合物，然后在堿性條件下與透明質(zhì)酸上的羥基進(jìn)行反應(yīng)，最后將氨基去保護(hù)后發(fā)生開(kāi)環(huán)反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)了透明質(zhì)酸的巰基化改性。該方法存在反應(yīng)過(guò)程復(fù)雜、反應(yīng)路線長(zhǎng)、純化過(guò)程使用大量有機(jī)試劑的不足。

CN102399295A公開(kāi)了一種低巰基化改性度生物相容高分子巰基化衍生物及其交聯(lián)材料和用途，該方法指出可以先對(duì)透明質(zhì)酸側(cè)鏈上的羥基進(jìn)行改性，使其在強(qiáng)堿條件下羧基化，然后羧基再與含巰基的化合物反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)透明質(zhì)酸的巰基化修飾。該方法在羥基上修飾上羧基，然后再與含巰基的化合物反應(yīng)，反應(yīng)流程繁瑣、反應(yīng)路線長(zhǎng)。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)目前外加交聯(lián)劑得到的交聯(lián)透明質(zhì)酸存在的交聯(lián)劑殘留的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種巰基化透明質(zhì)酸，該產(chǎn)品在透明質(zhì)酸的羥基位點(diǎn)上直接引入巰基，不會(huì)造成親水性羧基的損失，產(chǎn)品的水溶性和溶解速度不受影響。巰基的引入使巰基化透明質(zhì)酸的水溶液在氧氣環(huán)境下可自發(fā)交聯(lián)形成凝膠，也可與雙鍵在紫外光條件下發(fā)生巰基-烯的加成反應(yīng)形成凝膠，無(wú)須加入交聯(lián)劑，具有溶解快、成膠快和生物相容性好、安全性高等特點(diǎn)。

本發(fā)明還提供了上述巰基化透明質(zhì)酸的制備方法，該方法工藝簡(jiǎn)潔，操作簡(jiǎn)單，便于生產(chǎn)。