[發明專利]食源性小腸結腸炎耶爾森菌的LAMP檢測試劑盒及其應用在審
| 申請號： | 201911180875.3 | 申請日： | 2019-11-27 |
| 公開（公告）號： | CN110734992A | 公開（公告）日： | 2020-01-31 |
| 發明（設計）人： | 胡青海;王西;胡仲浩;譚攀攀;杜曉莉;徐欣欣;王權;劉光清 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院上海獸醫研究所(中國動物衛生與流行病學中心上海分中心) |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 31276 上海序倫律師事務所 | 代理人： | 周東萍 |
| 地址： | 200241 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 小腸結腸炎 食源性 引物 食品安全監測 檢測靈敏度 基因設計 試劑盒 檢測 可視 應用 基層 | ||
1.一種食源性小腸結腸炎耶爾森菌的LAMP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含特異性針對食源性小腸結腸炎耶爾森菌ail基因設計的引物，所述引物包括SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3、以及SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含10×ThermoPol反應緩沖液、dNTP混合液、MgSO4溶液。
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含DNA聚合酶。
4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含顯色試劑。
5.根據權利要求1-4中任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒采用等溫擴增進行檢測反應。
6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述等溫擴增的步驟包括：60℃～70℃恒溫孵育50～70分鐘，80℃～90℃滅活3～8分鐘。
7.一種用于食源性小腸結腸炎耶爾森菌LAMP檢測的引物，其特異性擴增食源性小腸結腸炎耶爾森菌ail基因，所述引物包括SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3、以及SEQ ID NO.4和SEQID NO.5。
8.權利要求1所述LAMP檢測試劑盒的應用，用于對食品進行食源性小腸結腸炎耶爾森菌的檢測。
9.權利要求1所述LAMP檢測試劑盒的應用，用于實驗室對食源性小腸結腸炎耶爾森菌進行鑒定。
10.一種對食品進行食源性小腸結腸炎耶爾森菌檢測的方法，包括以下步驟：
食品的采樣和增菌培養；
增菌樣品DNA提取；
采用權利要求1所述LAMP檢測試劑盒對樣品DNA進行檢測；
結果判定：肉眼觀察反應管中反應液是否有沉淀，如果有沉淀，表明食品含有食源性小腸結腸炎耶爾森菌；或在紫外燈下觀察反應液的顏色，如果呈現黃綠色熒光為陽性。
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