[發明專利]一種柴芍口服液中芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨含量的檢測方法

有效

• 申請號: 201911179898.2
• 申請日: 2019-11-27
• 公開（公告）號: CN111089916B
• 公開（公告）日: 2021-08-10
• 發明（設計）人: 魏秀麗;徐恩民;張傳津;李有志;楊志昆;張會梅
• 申請（專利權）人: 山東省獸藥質量檢驗所（山東省畜產品質量檢測中心）
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京智橋聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 11560
• 代理人: 洪余節

本發明涉及一種柴芍口服液中芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨含量的檢測方法，屬于中獸藥制劑的質量檢測領域。本發明采用C₁₈色譜柱，柱溫：35℃；以乙腈?0.4％磷酸水溶液，進行梯度洗脫；流速：0.35mL/min；進樣量：1μL；檢測波長為238nm。通過光譜圖、保留時間和峰面積參數對芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨進行定性定量檢測。三者在2～110μg/mL的范圍內線性關系良好；方法檢出限為1μg/mL，方法定量限為2μg/mL，完全滿足檢測需求。本發明色譜分離較好，分析速度較快，前處理簡單，檢測時間短，耗材流動相節約90％以上。

技術領域

本發明屬于中獸藥制劑的質量檢測領域，涉及一種芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨含量的檢測方法，具體涉及一種柴芍口服液中芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨含量的檢測方法。

背景技術

新中獸藥柴芍口服液具有透解郁熱、調和肝脾的功效。根據新獸藥相關技術要求對其進行了藥學、藥理毒理和臨床研究，主治由霉菌毒素導致的雞肝損傷。其主要含有五環三萜類、單萜苷類化合物、三萜皂苷和黃酮類化合物等，具有鎮靜、解熱鎮痛，抗炎和免疫調節、強心、抗氧化、抗菌、保肝等多種藥理活性。芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨為柴芍口服液中的重要有效成分。

中藥是一種由多種成分、多種因素構成的復雜體系，其質量的不穩定性、不可控性會直接導致中藥復方治療效果的不穩定、不可控。現有技術中，利用液相色譜方法對柴芍口服液只進行芍藥苷的檢測，檢測時間長，耗材流動相用量多。

發明內容

本發明針對上述問題，提供了一種芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨含量的檢測方法，具體涉及柴芍口服液中芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨含量的檢測方法，本發明檢測時間短，耗材流動相可節約90％以上。本發明的技術方案如下：

一種柴芍口服液中芍藥苷、甘草苷和甘草酸銨含量的檢測方法，具體步驟如下：

(1)供試品溶液的的制備精密量取本品1mL，置50mL容量瓶中，加 10％乙腈溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。分別依次精密吸取對照品溶液及供試品溶液各1μL，注入液相色譜儀，測定，即得供試品溶液；

(2)標準儲備液的制備精密稱取芍藥苷、甘草苷、甘草酸銨對照品適量mg，精密稱定，加10％乙腈溶液制成每1mL含0.11mg的溶液，即得標準儲備液；

(3)標準工作液的制備取混和對照溶液，倍比稀釋配置成55μg/mL、 25μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、2μg/mL、1μg/mL；

(4)色譜操作條件及參數色譜柱：C18色譜柱(2.1mm×100mm,1.7 μm)；流動相A：乙腈；流動相B：0.4％磷酸水溶液，進行梯度洗脫；流速： 0.35mL/min；進樣量：1μL；柱溫：35℃，進樣室溫度10℃。二極管陣列檢測器，掃描范圍：190-400nm，檢測波長為238nm；液相色譜梯度洗脫程序如表1所示：

表1梯度洗脫條件表

(5)測定法：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各2-10μL，注入液相色譜儀，測定并計算。

本發明還包括檢測限和定量限的測定對混合標準工作液，進行UPLC 的分析，并逐級降低其濃度，配置成約55μg/mL、25μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、 2μg/mL、1μg/mL，以溶液檢測時的信噪比(S/N)分別大于等于3和10作為藥物的檢測限和定量限。

本發明中柴芍口服液由柴胡、白芍、枳實、甘草4味中藥組方，經提取制備而成。

進一步的，所述柴芍口服液由以下按重量份數的組分組成：

柴胡5-15份、白芍3-5份、枳實5-15份、甘草1-10份。