[發明專利]一株酪丁酸梭菌及其應用

有效

• 申請號: 201911174166.4
• 申請日: 2019-11-26
• 公開（公告）號: CN110713958B
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發明（設計）人: 江凌;趙倩如;朱麗英;張志平
• 申請（專利權）人: 南京工業大學;南京北盛榮能源科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A23L5/20;C12R1/145
• 代理公司: 江蘇致邦律師事務所 32230
• 代理人: 徐蓓;尹妍

本發明公開了一株酪丁酸梭菌及其應用。該菌株保藏編號為GDMCC NO:60753，篩選自新疆地區奶牛的糞便，該菌株經過發酵培養，菌懸液和細胞破碎液均可以有效降解α?乳白蛋白和β?乳球蛋白，因而可用于去除牛乳中的過敏原，降低過敏反應的發病率，還可發酵生產低致敏乳源蛋白基料、制備低致敏性奶制品，降低嬰兒乳品過敏的風險。

技術領域

本發明屬于食品生物技術領域，具體涉及一株酪丁酸梭菌及其應用。

背景技術

牛乳過敏（CMA）是一種最常出現的食物過敏反應，3歲以下的兒童發病約占25%，占所有確診的食物過敏病例的9%。牛乳過敏主要是牛奶蛋白引起的過敏，牛乳過敏在臨床上是對乳蛋白的異常免疫反應，這可能是某種或多種蛋白產生免疫作用，與IgE抗體結合并造成迅速的IgE參與的反應。嬰兒牛奶過敏現象目前已經引起了人們廣泛關注，經過研究發現牛乳中主要的致敏蛋白是ɑ-乳白蛋白和β-乳球蛋白。

為了降低牛乳蛋白的致敏性，目前已有很多方法，比如熱處理、蛋白酶水解、乳酸發酵液降解等等。酪丁酸梭菌是一種人和動物腸道正常分布的革蘭氏陽性芽孢桿菌，較非芽胞益生菌制劑具有耐熱、耐酸和耐多種抗生素等生物學特性。酪丁酸梭菌能合成丁酸、乙酸等短鏈脂肪酸，以及多種氨基酸、B族維生素和維生素K，能分解胺類、吲哚類、硫化氫等有害物質，還能促進雙歧桿菌、乳酸菌等益生菌的生長；而酪丁酸梭菌用于降解致敏蛋白的研究未見公開報道。

發明內容

本發明的目的提供一株酪丁酸梭菌及其應用。該菌株可以降解牛奶中的主要致敏蛋白，尤其是過敏原中的β-乳球蛋白。

第一方面，本發明提供一株酪丁酸梭菌，其保藏編號為GDMCC NO：60753。

第二方面，本發明提供上述酪丁酸梭菌的培養方法。具體為，將酪丁酸梭菌接種至培養基，在37℃條件下厭氧培養。

進一步的，所述培養基為RCM培養基，其成分為：蛋白胨1% (w/v)，牛肉粉1%（w/v），酵母粉0.3% (w/v)，葡萄糖0.5% (w/v) ，可溶性淀粉0.1% (w/v) ，氯化鈉0.5% (w/v) ，醋酸鈉0.3% (w/v) ，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.05% (w/v) ，瓊脂0.05% (w/v)，pH 6.0。

進一步的，接種量為5%。

第三方面，本發明提供上述酪丁酸梭菌在降解牛奶中致敏蛋白中的應用。

所述致敏蛋白包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白。

本發明提供了一種具體應用方法，包括：將酪丁酸梭菌接入RCM培養基培養活化，取活化好的酪丁酸梭菌轉接到新鮮的RCM培養基中培養，離心去除上清液，用磷酸緩沖液將菌體重懸，形成不再增殖的菌懸液；

將菌懸液與分離乳清蛋白混合反應。

或將酪丁酸梭菌接入RCM培養基培養活化，取活化好的酪丁酸梭菌轉接到新鮮的RCM培養基中培養，離心去除上清液，將離心得到的菌體加入緩沖液后進行細胞破碎得到細胞破碎液；

將細胞破碎液與分離乳清蛋白混合反應。

進一步的，酪丁酸梭菌培養條件為：37℃厭氧條件下培養24 h。

進一步的，所述分離乳清蛋白成分包括β-乳球蛋白和α-乳白蛋白。

進一步的，菌懸液/細胞破碎液與分離乳清蛋白混合反應的條件為：20~50℃條件下反應24 h；優選37℃。

本發明的酪丁酸梭菌是從新疆地區褐牛的糞便中分離得到，通過選擇性富集篩選可獲得水解牛乳蛋白的菌株。該菌株經過發酵后能有效降解β-乳球蛋白、α-乳白蛋白，因而可用于去除牛乳中的過敏原，降低過敏反應的發病率，還可發酵生產低致敏乳源蛋白基料、制備低致敏性奶制品，降低嬰兒乳品過敏的風險。