[發明專利]一種基于表面增強拉曼散射的金納米標記的試紙條、制備方法及使用方法

有效

• 申請號: 201911146095.7
• 申請日: 2019-11-19
• 公開（公告）號: CN110779905B
• 公開（公告）日: 2022-05-20
• 發明（設計）人: 肖瑞;汪崇文;陸路春
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N33/68;G01N33/558;G01N33/532;B82Y40/00
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 王煥

1.一種基于表面增強拉曼散射的金納米標記的試紙條，其特征在于，其包括共軛墊，所述共軛墊上含有金納米棒和拉曼分子，所述拉曼分子修飾于所述金納米棒的表面，所述金納米棒的局域表面等離子共振峰在690-825nm之間；所述金納米棒的表面還修飾有牛血清白蛋白，牛血清白蛋白通過羧基端肽鏈與檢測抗體的氨基端肽鏈偶聯； 所述試紙條還包括PVC底板、抗體致敏的硝酸纖維素膜、樣品墊和吸水紙，在所述的PVC底板上，依次粘貼已抗體致敏的硝酸纖維素膜、共軛墊、樣品墊和吸水紙。

2.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述金納米棒的局域表面等離子共振在785nm。

3.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述拉曼分子為DTNB，MBA，DTTC或PATP。

4.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述拉曼分子為DTNB。

5.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述檢測抗體為腫瘤標志物檢測抗體。

6.根據權利要求5所述的試紙條，其特征在于，所述檢測抗體為鼠抗人甲胎蛋白檢測抗體。

7.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，抗體包被膜上涂覆有指示抗體和捕獲抗體分別形成質控線和檢測線；

所述指示抗體為Y抗X抗體，所述捕獲抗體為X抗人腫瘤標志物，X為單克隆抗體，Y為多克隆抗體。

8.根據權利要求7所述的試紙條，其特征在于，所述單克隆抗體來源于小鼠或大鼠，所述多克隆抗體來源于羊、兔或馬。

9.根據權利要求7所述的試紙條，其特征在于，所述捕獲抗體為鼠抗人甲胎蛋白捕獲抗體，所述指示抗體為羊抗鼠IgG，所述抗體包被膜為NC膜。

10.一種使用權利要求1-9任一項所述的試紙條進行腫瘤標志物檢測的方法，所述方法不涉及疾病的治療和診斷，其特征在于，其包括如下步驟：將待測樣本置于樣品墊上。

11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于，所述方法還包括用拉曼光譜儀記錄檢測線的表面增強拉曼散射信號或者肉眼觀察檢測線的條帶顏色。

12.根據權利要求11所述的方法，其特征在于，所述拉曼光譜儀的激發波長為785nm。

13.一種如權利要求1-9任一項所述的試紙條的制備方法，其特征在于，其包括如下步驟：將金納米棒用拉曼分子進行修飾制得修飾有拉曼分子的金納米棒；所述制備方法還包括用修飾有拉曼分子的金納米棒制備共軛墊，再將已致敏的硝酸纖維素膜、所述共軛墊、樣品墊和吸收墊在PVC底板上依次組裝；

制備共軛墊的方法包括在修飾有拉曼分子的金納米棒表面進行牛血清白蛋白的包覆得到包覆有牛血清白蛋白的金納米棒，再將檢測抗體與包覆有牛血清白蛋白的金納米棒偶聯制得偶聯有抗體的金納米棒，然后將偶聯有抗體的金納米棒用金標稀釋液混勻，滴加在金標結合墊上制得共軛墊。

14.根據權利要求13所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括金納米棒的制備，金納米棒的制備包括在每40ml的CTAB溶液中添加0.8ml的氯金酸、0.3-0.35ml 0.01M的硝酸銀、0.4ml的鹽酸、0.32ml的抗壞血酸和0.1ml種子液。