[發(fā)明專利]一種高地芽孢桿菌J45及其獲取方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911143374.8
• 申請(qǐng)日: 2019-11-20
• 公開（公告）號(hào): CN110846252B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蓋曉彤;盧燦華;雷麗萍;馬俊華;姜寧;余清;鄒聰明;夏振遠(yuǎn)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省煙草農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/02;A24B15/20;C12R1/07
• 代理公司: 昆明知道專利事務(wù)所(特殊普通合伙企業(yè)) 53116
• 代理人: 姜開俠;姜開遠(yuǎn)

1.一株高地芽孢桿菌J45，其特征在于，所述的高地芽孢桿菌（Bacillus altitudinis）J45，已在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，其保藏編號(hào)為CCTCC No.M2019666。

2.一種權(quán)利要求1所述的高地芽孢桿菌J45的應(yīng)用，其特征在于，所述高地芽孢桿菌（Bacillus altitudinis）J45在煙草特有亞硝胺定向降解中的應(yīng)用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述在煙草特有亞硝胺定向降解中的應(yīng)用包括發(fā)酵、接種和降解步驟，具體包括：

A、發(fā)酵：將高地芽孢桿菌（Bacillus altitudinis）J45接種到斜面培養(yǎng)基上于溫度25~30℃下培養(yǎng)24~36h得到發(fā)酵種子；將發(fā)酵種子接種到種子培養(yǎng)液中于溫度25~30℃下培養(yǎng)24~36h得到發(fā)酵菌劑，接種量為3~5v/v%，搖瓶裝液量為25~35v/v%；

所述的斜面培養(yǎng)基以g/L計(jì)為：蛋白胨8.0~12.0、牛肉浸膏2.0~4.0、NaCl4.0~6.0、瓊脂15.0~19.0，pH7.0~7.5；

所述的種子培養(yǎng)液成分以g/L計(jì)為：胰蛋白胨8.0~12.0、酵母浸膏4.0~6.0、NaCl4.0~6.0；

B、接種：在煙葉調(diào)制或制絲過程中，將發(fā)酵菌劑按照煙葉或煙絲重量的3~5%進(jìn)行噴施；

C、降解：噴施過發(fā)酵菌劑的煙葉或煙絲需保持4~7天的降解時(shí)間，即可實(shí)現(xiàn)煙葉或煙絲中NNN、NNK、NAB和NAT的有效降解。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述發(fā)酵菌劑的有效活菌數(shù)為1×10⁹~1×10¹⁰個(gè)/mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，C步驟所述降解對(duì)于在調(diào)制前接種的煙葉，無需設(shè)定特殊降解條件，對(duì)于在制絲過程中接種的煙絲，需調(diào)節(jié)煙絲的水分含量為30~40%，并于25~35℃的條件下保持5天的降解時(shí)間。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，C步驟所述降解在噴施過發(fā)酵菌劑的煙葉或煙絲保持4~7天的降解時(shí)間后，煙葉或煙絲中NNN、NNK、NAB和NAT的總降解率為27.64~52.37%。