[發(fā)明專利]提高2C-like細胞的小鼠胚胎干細胞誘導培養(yǎng)液及小鼠胚胎干細胞誘導培養(yǎng)方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911136323.2 | 申請日： | 2019-11-19 |
| 公開（公告）號： | CN110804581B | 公開（公告）日： | 2023-02-14 |
| 發(fā)明（設計）人： | 吳寶江;包斯琴;王艷秋;李喜和 | 申請（專利權）人： | 內蒙古大學 |
| 主分類號： | C12N5/0735 | 分類號： | C12N5/0735;C12N5/073;C12N5/10 |
| 代理公司： | 天津市杰盈專利代理有限公司 12207 | 代理人： | 趙敬 |
| 地址： | 010070 內蒙古自治區(qū)呼*** | 國省代碼： | 內蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 提高 like 細胞 小鼠 胚胎 干細胞 誘導 培養(yǎng)液 培養(yǎng) 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種提高2C-like細胞的小鼠胚胎干細胞誘導培養(yǎng)方法在小鼠胚胎干細胞誘導培養(yǎng)中的應用，其特征在于，包括以下步驟：
(1)選用N2B27+2i/LIF培養(yǎng)液培養(yǎng)的小鼠胚胎干細胞，即2i/L-ESCs，在37℃、5％CO2濃度狀態(tài)下2i/L-ESCs呈邊緣整齊的三維穹頂式細胞克隆形態(tài)；
每500ml誘導培養(yǎng)液N2B27+2i/LIF組成為：
(2)取步驟(1)得到的1x105個小鼠ESCs轉移至誘導培養(yǎng)液N2B27+2i/LIF+RA中，在37℃、5％CO2濃度條件下誘導培養(yǎng)48小時，獲得2C-like細胞；
每500ml誘導培養(yǎng)液N2B27+2i/LIF+RA組成為：
所述基礎培養(yǎng)液為基礎培養(yǎng)液DMEM/F12和基礎培養(yǎng)液Neurobasal，二者體積比為1:1；
所述小鼠胚胎干細胞選用2-細胞胚胎基因NELFA和MERVL標記的轉基因細胞系。
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