[發明專利]提高DNA甲基化的小鼠胚胎干細胞培養液及小鼠胚胎干細胞誘導培養方法有效
| 申請號: | 201911135063.7 | 申請日: | 2019-11-19 |
| 公開(公告)號: | CN110791472B | 公開(公告)日: | 2023-03-21 |
| 發明(設計)人: | 吳寶江;包斯琴;張寶靜;李喜和 | 申請(專利權)人: | 內蒙古大學 |
| 主分類號: | C12N5/0735 | 分類號: | C12N5/0735;C12N5/10 |
| 代理公司: | 天津市杰盈專利代理有限公司 12207 | 代理人: | 趙敬 |
| 地址: | 010070 內蒙古自治區呼*** | 國省代碼: | 內蒙古;15 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 提高 dna 甲基化 小鼠 胚胎 干細胞 培養液 誘導 培養 方法 | ||
1.一種提高DNA甲基化的小鼠胚胎干細胞培養液在小鼠胚胎干細胞誘導培養中的應用,其特征在于,包括以下步驟:
(1)小鼠胚胎干細胞的準備
選用N2B27+2i/LIF培養液培養的小鼠胚胎干細胞,即2i/L-ESCs,在37℃、5%CO2濃度狀態下2i/L-ESCs呈邊緣整齊的三維穹頂式細胞克隆形態;
每500ml N2B27+2i/LIF培養液的組成:
所述基礎培養液為基礎培養液DMEM/F12和基礎培養液Neurobasal,二者體積比為1:1;
(2)制備高甲基化的小鼠胚胎干細胞
將步驟(1)中制備的小鼠胚胎干細胞2i/L-ESCs用S/L培養液,培養5天,再用N2B27+2i/LIF培養液進行誘導小鼠胚胎干細胞,穩定傳代40代以上;
每500ml S/L培養液的組成:
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