[發明專利]一種密碼子優化的玉足海參α-淀粉酶基因及其重組表達載體與應用有效
| 申請號： | 201911119796.1 | 申請日： | 2019-11-15 |
| 公開（公告）號： | CN110791513B | 公開（公告）日： | 2021-05-25 |
| 發明（設計）人： | 任春華;吳小芬;阮堯;陳廷;江曉 | 申請（專利權）人： | 中國科學院南海海洋研究所 |
| 主分類號： | C12N15/56 | 分類號： | C12N15/56;C12N15/11;C12N15/70;C12N1/21;C12N9/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001 | 代理人： | 陳潔娣;劉明星 |
| 地址： | 511458 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 密碼子 優化 海參 淀粉酶 基因 及其 重組 表達 載體 應用 | ||
1.一種密碼子優化的玉足海參α-淀粉酶基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一組權利要求1所述的密碼子優化的玉足海參α-淀粉酶基因的擴增引物，其特征在于，包括以下引物：
AMY-CO-F1：5'-TGGAAATGGACAGACGTAGCTCTT-3'；
AMY-CO-F2：5'-CAGTTTGATACCAACGCGGTGGGCGATCGCGAAACCATTGTGCAGCTGTTTAGCTGGAAATGGACAGACGTAGCTCTT-3'；
A-Xho1-R：5'-GTGGTGGTGGTGGTGCTCGAGTCTATATGAAAGAAAGTGAC-3'；
其中，引物AMY-CO-F1和A-Xho1-R用于ɑ-淀粉酶基因的剪輯，引物AMY-CO-F2和A-Xho1-R用于ɑ-淀粉酶密碼子優化序列的獲得。
3.一種重組表達載體，其特征在于，所述的重組表達載體含有權利要求1所述的密碼子優化的玉足海參α-淀粉酶基因；所述的重組表達載體的表達載體為pET28a質粒。
4.一種重組基因工程菌，其特征在于，所述的重組基因工程菌含有權利要求3所述的重組表達載體。
5.根據權利要求4所述的重組基因工程菌，其特征在于，所述的重組基因工程菌的宿主菌為大腸桿菌BL21。
6.一種權利要求5所述的重組基因工程菌的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：
將權利要求1所述的密碼子優化的玉足海參α-淀粉酶基因克隆至pET28a質粒，得到重組表達載體，將重組表達載體轉化大腸桿菌BL21，得到重組基因工程菌。
7.權利要求1所述的密碼子優化的玉足海參α-淀粉酶基因或權利要求3所述的重組表達載體在原核表達系統中制備α-淀粉酶中的應用。
8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的原核表達系統為大腸桿菌BL21。
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