[發(fā)明專利]一種獲取木本植物維管形成層的方法及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911117532.2 | 申請日： | 2019-11-15 |
| 公開（公告）號： | CN110926851B | 公開（公告）日： | 2022-03-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張建霞;王雪;彭昌操;趙小蘭;龍健梅 | 申請（專利權(quán)）人： | 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | G01N1/06 | 分類號： | G01N1/06;G01N1/36 |
| 代理公司： | 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245 | 代理人： | 黃瑩 |
| 地址： | 510642 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 獲取 木本植物 形成層 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種獲取木本植物維管形成層的方法，其特征在于：
將含有維管形成層的木本植物組織石蠟切片用激光顯微切割方法獲取其中的維管形成層；
所述的含有維管形成層的木本植物組織是黃梁木種子試管苗移栽后四月齡幼苗的莖節(jié)；
所述的石蠟切片，其制作包含將材料固定、脫水、透明、滲蠟、包埋、切片、脫蠟的步驟；
所述的固定所用的固定劑由卡諾固定液與丙酮按體積比(8∶2)～(6∶4)組成；
所述的脫水所用的脫水劑為正丁醇；
所述的透明所用的透明劑為正丁醇；
所述的滲蠟的具體操作為：先采用50％石蠟進行第一次滲蠟，再采用100％石蠟進行第二次～第四次滲蠟；
所述的脫蠟的脫蠟劑為二甲苯，脫蠟的次數(shù)為2次；
所述的包埋采用100％石蠟包埋2次
所述的切片，其厚度為12～14μm；
所述的激光顯微切割采用Leica AS LMD 7000激光顯微切割系統(tǒng)，在10～20倍物鏡下，所使用的激光參數(shù)體系為：激光能量40～44，激光孔徑4～8，切割速度15～16，發(fā)射強度100％，脈沖頻率1891；
使用石蠟切片結(jié)合激光顯微切割方法獲取的維管形成層組織細胞結(jié)構(gòu)完整，含有完整的RNA；
所述的使用石蠟切片結(jié)合激光顯微切割方法獲取的維管形成層可用于構(gòu)建cDNA文庫。
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