[發(fā)明專利]華支睪吸蟲液滴式數(shù)字PCR檢測(cè)試劑盒及應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201911112701.3 | 申請(qǐng)日： | 2019-11-14 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN110760596A | 公開（公告）日： | 2020-02-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 沈玉娟;徐夢(mèng);曹勝魁;張小凡;曹建平 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6888 | 分類號(hào)： | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 31325 上海市匯業(yè)律師事務(wù)所 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 200025 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 華支睪吸蟲 探針 引物 檢測(cè)試劑 華支睪吸蟲感染 氧化酶亞單位 特異性引物 細(xì)胞色素C 高效檢測(cè) 疾病診斷 上游引物 下游引物 熒光探針 糞便DNA 數(shù)字PCR 試劑盒 液滴式 感染 檢測(cè) 可用 制備 靈敏 基因 敏感 應(yīng)用 成功 | ||
1.一種華支睪吸蟲液滴式數(shù)字PCR檢測(cè)試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括根據(jù)華支睪吸蟲細(xì)胞色素C氧化酶亞單位1基因COI基因設(shè)計(jì)的特異性引物及熒光探針。
2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述特異性引物及熒光探針的序列如下：
其上游引物為如SEQ ID NO.1所示序列；其下游引物為如SEQ ID NO.2所示序列；
所述熒光探針為如SEQ ID NO.3所示序列；所述熒光探針的5’端和3’端分別連接有熒光報(bào)告基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)；熒光報(bào)告基團(tuán)包括：FAM、VIC、HEX、CY5和ROX；熒光淬滅基團(tuán)包括：MGB、BHQ1、Eclipse 和TAMRA。
3.如權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光報(bào)告基團(tuán)為FAM；所述熒光淬滅基團(tuán)為BHQ1。
4.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括以下液滴式數(shù)字PCR反應(yīng)體系：2× ddPCR預(yù)混液10μl，DNA模板1μl，10μmol如權(quán)利要求1所述的上游引物和下游引物各1μl，10μmol如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的探針0.5μl，無菌水6.5μl，共20μl。
5.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述液滴式數(shù)字PCR的退火溫度為53℃-60℃。
6.如權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述液滴式數(shù)字PCR的退火溫度為56℃。
7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述液滴式數(shù)字PCR的擴(kuò)增反應(yīng)條件如下：
。
8.如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述液滴式數(shù)字PCR的擴(kuò)增反應(yīng)條件中的升降溫度梯度為2 ℃/s；反應(yīng)總體積設(shè)為40 μl。
9.如權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的試劑盒在制備感染華支睪吸蟲疾病診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所，未經(jīng)中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201911112701.3/1.html，轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
