[發明專利]一種具有延緩衰老功能的紫甘藍花青素及其制備方法

在審

• 申請號: 201911105746.8
• 申請日: 2019-11-13
• 公開（公告）號: CN110845463A
• 公開（公告）日: 2020-02-28
• 發明（設計）人: 敬璞;張楠
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;C07H17/07;C07H1/08;A61K36/31;A61P39/06;A23L33/105
• 代理公司: 上海旭誠知識產權代理有限公司 31220
• 代理人: 鄭立

本發明公開了一種具有延緩衰老功能的紫甘藍花青素及其制備方法，涉及保健品技術領域，制備方法包括：S1，制得紫甘藍粗提液；S2，制得紫甘藍花青素粗提液；S3，制得濃縮液；S4，制備得到紫甘藍花青素。本發明通過溶劑法提取分離、堿水解脫酰基化、XAD?7HP大孔樹脂初級別純化和半制備型高效液相色譜再純化后富集，制備高純度紫甘藍花青素，得到紫甘藍花青素的純度接近60％，本發明通過D?半乳糖誘導的衰老C57BL/6J小鼠實驗結果表明，紫甘藍花青素提取物可以減輕D?半乳糖所致氧化水平的升高，提高小鼠的血清、腦組織、肝臟、脾臟和腎臟中超氧化物歧化酶，谷胱甘肽過氧化物酶的活力，提高總抗氧化水平，降低丙二醛積累。

技術領域

本發明屬于保健品技術領域，具體涉及一種具有延緩衰老功能的紫甘藍花青素及其制備方法。

背景技術

衰老，是多因素影響、多基因調控、多系統參與、多器官的組織結構發生改變而引起機體功能紊亂的復雜生物學過程，對于衰老的機制尚無準確的定論。近年隨著生命科學研究深入，關于衰老機制的多種學說如自由基學說、基因學說、線粒體氧化損傷學說和免疫學說等先后被提出。在眾多的學說中，自由基學說是經過多種實驗證明，且被國際社會認可的較全面解釋衰老機制的學說。現在社會經濟的發展和人民生活水平不斷提高，85歲及以上的年齡的人越來越多，但是人們活的更久的同時，在衰老群體中也存在更多的疾病和其他病癥。延緩衰老過程并降低年齡相關疾病發病率的營養藥物組合物成為人們的迫切需要。

紫甘藍屬十字花科蕓蔓屬，又稱紫椰菜、紫苞菜，是結球甘藍中的一個類型。紫甘藍產量高，結球緊實，價格較低，易儲藏和運輸，抗病蟲能力強，現作為一種可食用蔬菜在國內大范圍種植，也是餐桌上的一種常見菜。紫甘藍屬低熱量高纖維食物，具有豐富的葉酸，肥胖者及孕婦均可食用。紫甘藍含有豐富的生物活性物質，如花青素、多酚、硫苷等。其中花青素有很強的清除自由基的能力，可抗氧化、抑制心血管疾病、延緩衰老等。長期服用富含花青素的食品有利于促進身體健康，降低疾病風險。

常見的提取花青素的方法為乙醇溶液浸提，會含有大量其他的酚類物質，并且得到的花青素種類繁雜，純度較低。這些雜質會對后續花青素的活性造成不良的影響，而且純化后的花青素的穩定性以及生理活性均有顯著地提高。因此，花青素粗提物需要進一步地純化富集。紫甘藍花青素在堿的作用下可以水解掉酰化的有機酸，再經過分離純化可以得到純度較高的花青素。

現在市面上延緩衰老的功能食品種類較多，品種繁雜，目前已有原花青素、白藜蘆醇等在功能食品上的應用，但是未見通過堿水解，大孔樹脂純化等對紫甘藍花青素及其制成功能性食品的闡述。

發明內容

有鑒于現有技術的上述缺陷，本發明提供了一種具有延緩衰老功能的紫甘藍花青素及其制備方法，其要解決的技術問題是提供了一種延緩衰老的紫甘藍花青素，同時結合現代分子生物學技術，確保產品功效。

為實現上述目的，本發明提供了一種具有延緩衰老功能的紫甘藍花青素的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：

S1，將5g紫甘藍提取物置于燒杯中，按料液比加入60％乙醇，加入鹽酸控制pH值至酸性后充分混勻，再將燒杯置于磁力攪拌器上攪拌1h，然后使用離心機進行離心處理，收集上層提取液進行抽濾并旋轉蒸發至10mL，制得紫甘藍粗提液，將所述紫甘藍粗提液置于-4℃保存備用；

S2，按體積比1：10向所述紫甘藍花青素粗提液中加入氫氧化鉀溶液，在室溫下進行堿水解反應，待反應結束后，用鹽酸中和、酸化終止反應，制得紫甘藍花青素粗提液；

S3，向所述紫甘藍花青素粗提液中加入萃取液，充分混勻，靜置分層后收集水相，共重復萃取、收集3次，然后使用XAD-7HP大孔樹脂純化樣品，待上樣完畢后，依次使用5倍柱體積的去離子水，5倍柱體積的10％乙醇，5倍柱體積的20％乙醇，5倍柱體積的40％乙醇和5倍柱體積的60％乙醇洗脫，收集10％乙醇洗脫液并轉移至旋蒸瓶中，旋轉蒸發濃縮至10mL，制得濃縮液，將所述濃縮液置于-20℃保存備用；