[發明專利]一種從九香蟲中同時制備五種多巴胺類化合物的分離方法

有效

• 申請號: 201911098424.5
• 申請日: 2019-11-12
• 公開（公告）號: CN110818585B
• 公開（公告）日: 2023-05-30
• 發明（設計）人: 侯曉暉;徐天天
• 申請（專利權）人: 遵義醫科大學
• 主分類號: C07C231/24
• 分類號: C07C231/24;C07C233/18;C07D311/60;C07D319/20
• 代理公司: 遵義市岡鴻專利代理事務所(普通合伙) 52102
• 代理人: 陳源鴻

一種從九香蟲中同時制備五種多巴胺類化合物的分離方法，屬于化合物單體的分離純化技術領域。本發明以干燥的九香蟲為原料，通過乙醇提取、真空濃縮、分步萃取、硅膠柱富集與洗脫、高效制備液相色譜分離及產品回收步驟，同時得到五種多巴胺化合物單體；為更深入的研究九香蟲藥材的藥用價值以及新藥的合成與開發奠定基礎，同時也有利于九香蟲傳統資源的開發利用。

技術領域

本發明涉及一種動物化合物單體分離純化方法，具體涉及一種從九香蟲中同時制備五種多巴胺類化合物的分離方法，屬于中藥技術領域。

背景技術

本品為蝽科昆蟲九香蟲 CotidiuschinensisDallas的干燥體，又稱屁板蟲、打屁蟲、屁巴蟲等，分布于我國南方大部分地區和部分南亞國家。九香蟲作為藥食兩用昆蟲最早記載于《本草綱目》，是2015版《中國藥典》收載的中藥，具有理氣止痛、溫中助陽的作用，泡酒飲用可治療脾腎虧損，元陽不足。國內研究學者認為九香蟲具有抗菌、抗凝血、溶解血栓的功效，且對癌癥細胞具有一定的抑制作用，但是對九香蟲的有效成分明確鑒定出來的并不多，已報到的大多是關于脂肪酸、核苷和蛋白、多肽等物質。許多活性成分尚待確定。

國家知識產權局2014年4月16號公開了一種公開號為CN103724318?A，專利名稱為‘九香蟲酰胺A及其組合物和其在制藥和食品中的應用’，制備得到一種多巴胺類化合物單體，命名為九香蟲酰胺A，在腎病和慢性腎病藥物方面具有很好的療效。該專利同樣以九香蟲為原料，但是僅僅得到一種多巴胺類化合物單體，技術方案復雜，所涉及的溶劑種類過多，而且產率低，無法做進一步的深入研究。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從九香蟲中同時制備五種多巴胺類化合物的分離方法，為更深入的研究九香蟲活性物質與治療效果的關系奠定基礎，同時也有利于九香蟲中藥材資源的開發利用。本發明通過合理的工藝路線以及參數條件，同時從九香蟲中分離得到五種化合物單體成分，純度均達到98.0%以上。

為了實現上述技術目的，提出如下技術方案：

一種從九香蟲中同時制備五種多巴胺類化合物的分離方法，包括如下步驟：

步驟一：以干燥的九香蟲藥材為原料，粉碎成1-5mm的粗粉，按照重量比例加入2-10倍的70%乙醇溶液，超聲提取3次，提取時間分別為60min、45min、30min，合并提取液，過濾、60℃真空濃縮至無醇度，得九香蟲提取濃縮液；

步驟二：往步驟一濃縮液中依次加入石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，每個溶劑萃取3次，每次體積為溶液體積的1/3-2/3，收集、合并正丁醇萃取液，60℃真空濃縮至1/10體積；

步驟三：按照重量比，給步驟二濃縮液中加入1-3倍100-300目硅膠拌樣，進行硅膠柱層析，氯仿-甲醇梯度洗脫，收集1/5-1/1洗脫餾分，60℃真空濃縮至1/10-1/5體積，得到待制備溶液；

步驟四：將步驟三所得到的待制備溶液用0.45μm有機膜過濾，收集濾液，然后濾液進樣，進行九香蟲5種單體化合物的制備分離，并針對性的收集純度大于98.0%的各個單體的制備餾分溶液；在此過程中，紫外檢測器設置波長為280nm，進行在線檢測；

步驟五：將步驟（4）中進行高效制備液相色譜分離得到的5種制備餾分溶液，分別60℃真空濃縮至干，回收甲醇溶劑，固體放置于65℃干燥箱干燥12小時，即得到

（1）N-[2-(3,4-二羥基苯基)-2-羥基乙基]?乙酰胺；

（2）N-[(E)-2-(3,4-二羥基苯基)乙烯基]?乙酰胺；

（3）反式-2-(3',4'-二羥基苯基)-3-乙酰氨基-7-羥基乙基-1,4-苯并二惡烷；