[發明專利]重組人源III型膠原蛋白α1鏈及其應用

有效

• 申請號: 201911093124.8
• 申請日: 2019-11-11
• 公開（公告）號: CN110606896B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 錢松;王麗萍
• 申請（專利權）人: 江蘇悅智生物醫藥有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K14/78;C12N15/62;C12N15/81;C12N1/19;A61L15/32;A61L15/42;A61K8/65;A61Q19/00;C12R1/84
• 代理公司: 常州智慧騰達專利代理事務所(普通合伙) 32328
• 代理人: 曹軍

1.一種重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈，其特征在于，編碼該所述重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示，所述重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈從氨基端依次包含：氨基端親和純化標簽、人源Ⅲ型膠原成熟肽鏈以及羧基端親和純化標簽；

所述氨基端親和純化標簽為6His標簽，所述羧基端親和純化標簽為Strep標簽，所述人源Ⅲ型膠原成熟肽鏈包括人Ⅲ型膠原N端肽、人Ⅲ型膠原成螺旋區、人Ⅲ型膠原C端肽，所述人源Ⅲ型膠原成熟肽鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示；

制備該所述重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈的氨基酸序列的方法包括以下步驟：

S1、將天然膠原基因序列中的罕見密碼子優化為畢赤酵母的偏好密碼子；

S2、通過基因合成得到所述人源Ⅲ型膠原成熟肽鏈；

S3、設計所述人源Ⅲ型膠原成熟肽鏈的核苷酸序列的擴增引物F（SEQ ID NO: 3）和R（SEQ ID NO: 4），其中，擴增引物F（SEQ ID NO: 3）和R（SEQ ID NO: 4）如下所示：

F：CGGAATTCCATCATCATCATCATCATCAATACGACTCTTATGACGTGA，酶切位點為EcoRⅠ；

R：CGGAATTCTTACTTCTCGAATTGTGGGTGAGACCATCCATAATATGGTGCGAATCCAC，酶切位點EcoRⅠ；

S4、在擴增引物的N端增加能夠表達6His的核苷酸序列，C端增加能夠表達Strep的核苷酸序列后進行擴增，得到所述重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈。

2.一種重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈在制備醫用敷料中的應用，其特征在于，所述醫用敷料各組分的質量分數為：

根據權利要求1所述的重組人源Ⅲ型膠原蛋白0.1%～0.5%；

保濕劑1%～10%；

卡波姆0.1%～1%；

三乙醇胺0.1%～10%；

其余為純化水。

3.一種重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈在制備膠原蛋白敷料貼中的應用，其特征在于，所述膠原蛋白敷料貼由無紡布基材和設在所述無紡布基材上的膠原蛋白敷料組成，所述膠原蛋白敷料各組分的質量分數為：

根據權利要求1所述的重組人源Ⅲ型膠原蛋白0.1%～0.5%；

保濕劑1%～10%；

增稠劑0.1%～2%；

其余為純化水。

4.一種重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈在制備微整形的皮膚黏膜保護劑中的應用，其特征在于，所述皮膚黏膜保護基各組分的質量分數為：

根據權利要求1所述的重組人源Ⅲ型膠原蛋白0.1%～1%；

透明質酸鈉0.1%～1%；

保濕劑0～40%；

其余為純化水。

5.一種重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈在制備外用護膚品中的應用，其特征在于，所述外用護膚品各組分的質量分數為：

根據權利要求1所述的重組人源Ⅲ型膠原蛋白0.01%～0.1%；

保濕劑1%～5%；

丁二醇1%～5%；

透明質酸鈉0.01%～0.1%；

卡波姆0.1%～1%；

甜菜堿1%～5%；

絲肽0.01%～0.1%；

β-葡聚糖 0.1%～1%；

霍霍巴酯0.01%～0.1%；

甘草酸二鉀0.1%～0.5%；

三乙醇胺0.1%～1%；

其余為純化水。

6.一種重組人源Ⅲ型膠原蛋白α1鏈在制備導入性護膚品中的應用，其特征在于，所述導入性護膚品各組分的質量分數為：

根據權利要求1所述的重組人源Ⅲ型膠原蛋白0.1%～0.5%；

保濕劑1%～10%；

透明質酸鈉0.1%～0.5%；

小分子透明質酸鈉0.01%～0.05%；

氯化鈉0.8%～1%；

六勝肽0.0005%～0.002%；

其余為純化水。