[發明專利]一種花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法在審
| 申請號: | 201911088363.4 | 申請日: | 2019-11-08 |
| 公開(公告)號: | CN110669819A | 公開(公告)日: | 2020-01-10 |
| 發明(設計)人: | 王冕;張朝昕;陳明娜;王通;潘麗娟;許靜;禹山林;遲曉元;陳娜 | 申請(專利權)人: | 山東省花生研究所;青島市環境衛生發展中心 |
| 主分類號: | C12Q1/18 | 分類號: | C12Q1/18 |
| 代理公司: | 11340 北京天奇智新知識產權代理有限公司 | 代理人: | 陳嵐崴 |
| 地址: | 266000 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 病原真菌 致病性鑒定 腐爛病 花生 抗病品種選育 花生品種 花生種子 抗病種質 快速鑒定 重要意義 菌絲體 致病性 侵染 微創 沖洗 消毒 檢測 觀察 研究 | ||
1.一種花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,將感病花生品種的種子和不同組織分別經消毒、沖洗、微創處理后,接入病原真菌菌絲體塊,使病原真菌與花生種子和花生不同組織實現共培養,5天后觀察侵染致病情況。
2.根據權利要求1所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述花生腐爛病病原真菌為尖孢鐮孢菌。
3.根據權利要求2所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述尖孢鐮孢菌為尖鐮孢菌Hs-f,于2019年08月29日保藏于:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號為CGMCC NO:18130,地址為:北京市朝陽區北辰西路1號院3號,請求保藏單位為山東省花生研究所。
4.根據權利要求3所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述尖孢鐮孢菌Hs-f由以下方法培養而成:
(1)菌種活化:用挑取凍存菌株接種于5ml PDA液體培養基中,25℃、180rpm震蕩培養8h;
(2)富集培養:上述活化后的5ml培養液移入50ml PDA液體培養基中,25℃、180rpm震蕩培養過夜;
(3)擴大培養:取1ml所述的富集培養液,涂布于PDA培養基平板上,晾干后,重復涂布兩次,待晾干后置于25℃暗培養過夜。
5.根據權利要求4所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述的凍存菌株是由分離純化的單菌落經快速傳代至50代,保存的致病性穩定的菌株;
所述的快速傳代是指:
(1)挑取單菌落接種于5ml PDA液體培養基中,25℃、180rpm震蕩培養8h;
(2)取5ml(1)中的培養液移入50ml PDA液體培養基中,25℃、180rpm震蕩培養過夜;
(3)最后將(2)中的培養液,涂布于PDA培養基平板上,晾干后,重復涂布兩次,待晾干后25℃暗培養過夜;
(4)重復(1)~(3)將其傳代至50代。
6.根據權利要求1所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述感病花生品種為花育20號。
7.根據權利要求1所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述花生不同組織為花生幼苗根系、花生苗期莖部、花生幼苗子葉和花生葉片。
8.根據權利要求1所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述病原真菌與花生種子和花生不同組織共培養的條件為:25℃,光照為16h/8h,恒溫培養箱中培養7天。
9.根據權利要求1所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述病原真菌菌絲體塊接入量為直徑0.3cm的圓柱塊。
10.根據權利要求1所述花生腐爛病病原真菌的致病性鑒定方法,其特征在于,所述致病性的判定標準為接種點發黃發黑至腐爛擴散。
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