[發(fā)明專利]用于腫瘤外泌體自校準(zhǔn)檢測的雙功能雜化薄膜的制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911078972.1 | 申請日: | 2019-11-07 |
| 公開(公告)號: | CN110736779B | 公開(公告)日: | 2020-06-02 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 桂日軍;孫玉嬌;金輝 | 申請(專利權(quán))人: | 青島大學(xué) |
| 主分類號: | G01N27/416 | 分類號: | G01N27/416;G01N27/327;G01N27/31 |
| 代理公司: | 青島高曉專利事務(wù)所(普通合伙) 37104 | 代理人: | 張世功 |
| 地址: | 266071 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 用于 腫瘤 外泌體 校準(zhǔn) 檢測 功能 薄膜 制備 方法 | ||
本發(fā)明公開了用于腫瘤外泌體自校準(zhǔn)檢測的雙功能雜化薄膜的制備方法,基于黑磷納米片BPNSs、適體和二茂鐵Fc摻雜鈷基金屬有機(jī)骨架ZIF?67復(fù)合物在氧化銦錫ITO電極上簡易自組裝,構(gòu)建雙功能雜化薄膜即適體?BPNSs/Fc/ZIF?67/ITO。亞甲基藍(lán)MB標(biāo)記的適體與CD63蛋白特異性結(jié)合,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的蛋白俘獲。該蛋白是乳腺癌MCF?7細(xì)胞外泌體攜帶的特定生物分子,實(shí)現(xiàn)對該腫瘤細(xì)胞外泌體的檢測。以MB為響應(yīng)信號,F(xiàn)c為參比,構(gòu)建腫瘤外泌體定量檢測的自校準(zhǔn)傳感器。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明操作便捷、靈敏度高、成本低、特異性好,可作為一種新的外泌體自校準(zhǔn)檢測方法,用于生物醫(yī)學(xué)樣品中外泌體的定量檢測。
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于功能雜化薄膜材料和腫瘤外泌體傳感器的制備技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種基于黑磷納米片和二茂鐵摻雜的鈷基金屬有機(jī)骨架復(fù)合物自組裝的雙功能雜化薄膜材料的制備方法,其制備的薄膜材料可用于CD63跨膜蛋白的精準(zhǔn)俘獲和乳腺癌外泌體的自校準(zhǔn)檢測。
背景技術(shù):
外泌體是通過內(nèi)溶體途徑從多囊體中釋放的尺寸為50~100納米的細(xì)胞外囊泡,它從親本細(xì)胞中攜帶了大量生物高分子,包括跨膜和胞質(zhì)蛋白、mRNA、DNA和micro-RNA等。外泌體充當(dāng)著介導(dǎo)細(xì)胞間信息的信使,在探測疾病尤其癌癥相關(guān)的生理狀態(tài)改變方面發(fā)揮了重要作用。近年來,外泌體作為一種有前景的生物標(biāo)志物被廣泛用于癌癥的早期診斷,克服了癌癥檢測過程存在侵入式篩選的高成本和低敏感度的問題。當(dāng)前,大量的文獻(xiàn)資料報道了外泌體的定量檢測,但現(xiàn)有的檢測技術(shù)依然存在某些挑戰(zhàn),難以實(shí)現(xiàn)納米級外泌體的直接和特異性分析。例如,流式細(xì)胞術(shù)檢測受限于較弱的光散射,粒子追蹤方法缺乏特異性。在疾病早期階段,外泌體濃度較低,需要開發(fā)新的方法實(shí)現(xiàn)外泌體的高敏感檢測。
當(dāng)前用于外泌體檢測的方法主要包括流式細(xì)胞術(shù)、納米顆粒追蹤分析、表面等離子共振、比色、發(fā)光和電化學(xué)分析等。例如,Zhu等采用表面等離子共振成像技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對外泌體的定量檢測(Ling Zhu,Kun Wang,Jian Cui,Huan Liu,Xiangli Bu,Huailei Ma,Weizhi Wang,He Gong,Christopher Lausted,Leroy Hood,Guang Yang,Zhiyuan Hu,Label-free quantitative detection of tumor-derived exosomes through surfaceplasmon resonance imaging,Analytical Chemistry,2014,86,8857-8864);Xia等基于DNA包封單臂碳納米管構(gòu)建了比色檢測外泌體的方法(Yaokun Xia,Mengmeng Liu,Liangliang Wang,An Yan,Wenhui He,Mei Chen,Jianming Lan,Jiaoxing Xu,LunhuiGuan,Jinghua Chen,A visible and colorimetric aptasensor based on DNA-cappedsingle-walled carbon nanotubes for detection of exosomes,Biosensors andBioelectronics,2017,92,8–15)。李智洋等利用G-四連體-Hemin模擬過氧化酶催化H2O2反應(yīng)產(chǎn)生信號,結(jié)合滾環(huán)擴(kuò)增合成大量G-四連體進(jìn)行信號放大,以實(shí)現(xiàn)外泌體的定量檢測(李智洋,何農(nóng)躍,黃蓉蓉.專利名稱:一種基于適配體與滾環(huán)擴(kuò)增的外泌體檢測方法.國家發(fā)明專利.公開號:CN109655512A);王國勝開發(fā)了集外泌體分離純化和特異性外泌體半定量檢測的一種產(chǎn)品,構(gòu)建了基于外泌體的體外即時檢測平臺(王國勝.一種基于外泌體的體外即時檢測平臺及其檢測方法.國家發(fā)明專利.公開號:CN108872564A)。
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