[發(fā)明專利]異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911075093.3
• 申請日: 2019-11-06
• 公開（公告）號: CN110850085A
• 公開（公告）日: 2020-02-28
• 發(fā)明（設計）人: 王凱;孟令敏;韓美玉;張丹丹;高威;孫成艷;何浩會
• 申請（專利權）人: 迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/573
• 分類號: G01N33/573;G01N33/543;G01N33/532
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產(chǎn)權代理有限公司 22214
• 代理人: 于曉慶

1.異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于，包括：鏈霉親和素磁顆粒、化學發(fā)光標記物標記的異常凝血酶原單克隆抗體、偶聯(lián)標記物標記的異常凝血酶原單克隆抗體。

2.根據(jù)權利要求1所述的異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述鏈霉親和素磁顆粒中，磁顆粒的濃度為0.01～1％，磁顆粒的粒徑為0.05～3μm。

3.根據(jù)權利要求1所述的異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發(fā)光標記物標記的異常凝血酶原單克隆抗體中，異常凝血酶原單克隆抗體與化學發(fā)光標記物的摩爾比為1:1～20；所述化學發(fā)光標記物為吖啶酯、魯米諾、異魯米諾或三聯(lián)吡啶釕。

4.根據(jù)權利要求1所述的異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述偶聯(lián)標記物標記的異常凝血酶原單克隆抗體中，異常凝血酶原單克隆抗體與偶聯(lián)標記物的摩爾比為1:1～50；所述偶聯(lián)標記物為生物素。

5.根據(jù)權利要求1所述的異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于，還包括化學發(fā)光激發(fā)液，所述化學發(fā)光激發(fā)液包括A液和B液，所述A液為硝酸和過氧化氫溶液，B液為氫氧化鈉溶液。

6.根據(jù)權利要求1所述的異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于，還包括異常凝血酶原校準品，所述異常凝血酶原校準品的濃度分別為0.00mAU/mL、40.00mAU/mL、100.00mAU/mL、300.00mAU/mL、5000.00mAU/mL和30000.00mAU/mL。

7.如權利要求1至6中任意一項所述的異常凝血酶原化學發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、制備鏈霉親和素磁顆粒

取濃度50～100mg/mL的鏈霉親和素磁顆粒溶液0.5～1mL，加入5～10mLTBST溶液混勻后，置于磁分離器上分離磁顆粒，直至上清無混濁，棄上清，留取磁顆粒；重復清洗3次后，加入緩沖液A配制成磁顆粒濃度為0.01～1％的固相試劑，即得鏈霉親和素磁顆粒，2～8℃保存?zhèn)溆茫?/p>

步驟二、制備化學發(fā)光標記物標記的異常凝血酶原單克隆抗體

將化學發(fā)光標記物溶解于DMF溶液中，按照異常凝血酶原單克隆抗體與化學發(fā)光標記物摩爾比為1:1～20的比例加入異常凝血酶原單克隆抗體進行標記，加入標記緩沖液，避光反應2～6h；

步驟三、制備偶聯(lián)標記物標記的異常凝血酶原單克隆抗體

將偶聯(lián)標記物溶解于DMF溶液中，按照異常凝血酶原單克隆抗體與偶聯(lián)標記物摩爾比為1:1～50的比例加入異常凝血酶原單克隆抗體進行標記，加入標記緩沖液，避光反應2～6h。

8.根據(jù)權利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟一中，所述緩沖液A由濃度為50mM的MES溶液、0.05％吐溫-20和0.05％Proclin300組成，pH為7.4。

9.根據(jù)權利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟二和步驟三中，標記緩沖液為PB緩沖液，pH為7.4，濃度為20mmol/L。

10.根據(jù)權利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述化學發(fā)光標記物和偶聯(lián)標記物的濃度均為2mg/mL。