[發明專利]一種泌尿腫瘤實體瘤原代細胞的培養方法

在審

• 申請號: 201911065991.0
• 申請日: 2019-11-04
• 公開（公告）號: CN112760285A
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發明（設計）人: 尹申意;張函槊
• 申請（專利權）人: 北京基石生命科技有限公司
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張立娜

本發明公開了一種泌尿腫瘤實體瘤原代細胞的培養方法。本發明提供了泌尿腫瘤實體瘤原代細胞培養方法及配套試劑，該技術核心是：用溫和細胞解離試劑處理泌尿腫瘤實體瘤組織，最大程度保證了組織中腫瘤細胞活力；配制特殊無血清培養基，利用懸浮培養體系對泌尿腫瘤來源的實體瘤細胞進行體外培養，保證腫瘤細胞正常擴增的同時最大限度的排除正常細胞的干擾。利用本發明方法得到的泌尿腫瘤實體瘤原代細胞培養物可用于多種細胞水平體外實驗、二代測序、構建動物模型、構建細胞系等等。可預見，這種培養方法在泌尿腫瘤的研究和臨床診斷治療領域具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種泌尿腫瘤實體瘤原代細胞的培養方法。

背景技術

泌尿腫瘤是發生于泌尿系統任意部位的腫瘤。包括腎、腎盂、輸尿管、膀胱、尿道腫瘤。由于尿液在膀胱內停留時間最長，所以引起的膀胱癌也最為常見。泌尿系統腫瘤常在40歲以后發出，男性比女性多一倍左右。據國家癌癥中心2018年數據統計，2014年，我國膀胱癌和腎癌發病率分別占男性惡性腫瘤發病率的4.5％和2.7％。近年來，中國泌尿發病率逐年上升，平均每年增長約6％，

盡管世界各國的科研和醫療機構對泌尿腫瘤的病因以及發生發展過程的研究都有很大力度的投入，但是人類對這種疾病仍然知之甚少。泌尿腫瘤是一類復雜疾病，其發生、發展是一個動態的過程，涉及到諸多信號分子相互作用，形成了一個復雜的分子調控網絡，同時還受到外界環境因素的影響。泌尿腫瘤的病因和發生發展過程有很強的個體差異性，不能一概而論。此外，泌尿腫瘤可選擇的治療方式和藥物較多，如何選擇最優的治療方案一直是臨床診療的一大難題。因此將泌尿腫瘤實體瘤原代細胞培養物作為模型進行個體化精準研究是泌尿腫瘤研究領域乃至泌尿腫瘤診斷治療領域的趨勢。

現有的原代腫瘤細胞培養技術主要有2D培養，3D培養，重編程培養等幾類，這些方法都不同程度的面臨培養周期極長，培養成功率低，雜細胞難以去除等問題。

發明內容

為了有效解決上述技術問題，本發明提供了一種新的泌尿腫瘤實體瘤原代細胞培養技術及配套試劑，該技術的核心是：(1)用溫和細胞解離試劑處理泌尿腫瘤實體瘤組織，最大程度的保證了組織中腫瘤細胞的活力；(2)配制特殊的無血清培養基，利用懸浮培養體系對泌尿腫瘤實體瘤來源的腫瘤細胞進行體外培養，保證腫瘤細胞正常擴增的同時最大限度的排除正常細胞的干擾。

第一方面，本發明要求保護一種培養泌尿腫瘤實體瘤原代細胞的方法。

本發明所要求保護的培養泌尿腫瘤實體瘤原代細胞的方法，可包括如下步驟：

利用泌尿腫瘤實體瘤原代細胞培養基懸浮培養泌尿腫瘤實體瘤原代細胞；