[發(fā)明專利]一種姜黃素納米復(fù)合物及其制備方法和用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911052140.2
• 申請日: 2019-10-31
• 公開（公告）號: CN110859819A
• 公開（公告）日: 2020-03-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王云龍;支開旗;李玉林;王繼創(chuàng);張怡清;王敏;程蕾
• 申請（專利權(quán)）人: 河南省生物工程技術(shù)研究中心;鄭州倍賽泰生物科技有限公司
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K31/12;A61K47/42;A61P35/00;A61P15/08;C12N15/36;C12N15/70;C07K14/02
• 代理公司: 鄭州銘晟知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 41134
• 代理人: 張鵬

1.一種姜黃素納米復(fù)合物，其特征在于，所述姜黃素納米復(fù)合物包括HBc VLPs載體和包裹于所述HBc VLPs載體內(nèi)的姜黃素和/或姜黃素衍生物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的姜黃素納米復(fù)合物，其特征在于，所述HBc VLPs載體具有如下氨基酸序列：從N端到C端依次為HBc-144和NS5A多肽且所述HBc-144的主要免疫區(qū)域插設(shè)有靶向肽，所述靶向肽的兩端分別通過連接肽與所述HBc-144相連。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的姜黃素納米復(fù)合物，其特征在于，所述NS5A多肽的氨基酸序列為AGSWLRDIWDWICEVLSDFKTWLKAKAKLMPTM；所述靶向肽為RGD序列，所述連接肽的氨基酸序列為GTSGSSGSGSGGSGSGGGG；所述靶向肽和連接肽用于替代所述HBc-144的第79和80位氨基酸。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的姜黃素納米復(fù)合物，其特征在于，所述HBc-144載體的C末端還連接有6xHis標(biāo)簽。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的姜黃素納米復(fù)合物，其特征在于，所述姜黃素納米復(fù)合物為液體劑型或固體劑型，所述液體劑型可選自溶液、懸浮液、乳液、氣溶膠；所述固體劑型可選自片劑、貼劑、膠囊、丸劑、顆粒劑、細(xì)粒劑或粉劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項所述的姜黃素納米復(fù)合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：(1)通過基因工程的方法制備HBc VLPs納米顆粒；(2)使所述HBcVLPs納米顆粒解聚成所述HBc VLPs載體；(3)使所述姜黃素和/或姜黃素衍生物包封于所述HBc VLPs載體內(nèi)，即得所述姜黃素納米復(fù)合物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的姜黃素納米復(fù)合物的制備方法，其特征在于，所述HBc VLPs納米顆粒的制備方法為：將編碼所述HBc VLPs載體的核苷酸序列作為目的基因插入到質(zhì)粒載體上；將所述質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化入大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞；挑取單菌落在LB培養(yǎng)基上擴(kuò)大培養(yǎng)至OD600達(dá)到0.6-0.8；用IPTG于18℃誘導(dǎo)培養(yǎng)18h；收集并裂解菌體，純化制備得到的HBcVLPs納米顆粒。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的姜黃素納米復(fù)合物的方法，其特征在于，使所述HBc VLPs納米顆粒解聚成所述HBc VLPs載體的方法為：在1000r/min磁力攪拌下向步驟(1)得到的HBcVLPs納米顆粒中加入解聚緩沖液，室溫解聚4～6h即得所述HBc VLPs載體；所述解聚緩沖液為pH＝7.0的50mM Tris-HCl和0～10M尿素組成。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的姜黃素納米復(fù)合物的方法，其特征在于，所述步驟(3)包括如下步驟：在攪拌下，向所述HBc VLPs載體中加入姜黃素溶液，4℃放置30min使充分混勻，得混合液；將所述混合液裝入透析袋中并置于聚合緩沖液中透析過夜，透析溫度為4℃，每4h更換1次聚合緩沖液；所述聚合緩沖液的成分為：pH為7.0的50mMTris-HCl，150mM NaCl，10％甘油，1％甘氨酸。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項所述的姜黃素納米復(fù)合物的用途，其特征在于，所述姜黃素納米復(fù)合物在制備抗卵巢癌藥物中的應(yīng)用。