[發明專利]一種基于葉綠體DNA差異的秈粳稻米種類熒光PCR快速檢測鑒定方法在審
| 申請號： | 201911050790.3 | 申請日： | 2019-10-31 |
| 公開（公告）號： | CN110669864A | 公開（公告）日： | 2020-01-10 |
| 發明（設計）人： | 陳文炳;邵碧英;繆婷玉;彭娟 | 申請（專利權）人： | 福州海關技術中心 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 35100 福州元創專利商標代理有限公司 | 代理人： | 饒文君;蔡學俊 |
| 地址： | 350003 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 粳稻 葉綠體DNA 熒光PCR 秈稻 熔解 稻米 熒光PCR檢測 反向引物 快速檢測 序列差異 正向引物 秈粳稻 擴增 | ||
【權利要求書】：
1.檢測鑒定秈粳稻米種類的熒光PCR引物，其特征在于：所述引物的核苷酸序列為
正向引物F4：3’-AATCGCAACCCCTTTCCGC-5’，
反向引物R1：3’-TTGAGGATTATTCCATGATTCC-5’。
2.一種基于葉綠體DNA序列差異的秈粳稻米種類熒光PCR快速檢測鑒定方法，其特征在于：以粳稻、秈稻的總DNA為模板，以F4/R1為引物，分別進行SYBR Green熒光PCR擴增；
PCR反應體系：2×SYBR Premix Ex Taq 12.5μL，引物F4/R1各0.5μL，200ng 總DNA 2μL，ddH2O補足至25μL；
反應條件：95℃ 30s；95℃ 5s，60℃34s，40個循環；65℃~95℃熔解曲線分析。
3.根據權利要求2所述的一種基于葉綠體DNA序列差異的秈粳稻米種類熒光PCR快速檢測鑒定方法，其特征在于：SYBR Green熒光PCR擴增產物秈稻為135 bp、粳稻為204 bp片段，SYBR Green熒光PCR擴增熔解溫度Tm為秈稻Tm值76.5℃，粳稻Tm值78.0℃，二者Tm值差為1.5；該熔解溫度的差別，用于判別鑒定待測稻米所屬的種類。
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