[發明專利]鑒別冬蟲夏草的PCR試劑盒及PCR方法在審
| 申請號： | 201911043013.6 | 申請日： | 2019-10-29 |
| 公開（公告）號： | CN112725473A | 公開（公告）日： | 2021-04-30 |
| 發明（設計）人： | 段慶梓;梁恒興;王巍;戴琪;張彪;尚柯;張玉 | 申請（專利權）人： | 成都市食品藥品檢驗研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峽;張娟 |
| 地址： | 610000 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 鑒別 冬蟲夏草 pcr 試劑盒 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一對鑒別冬蟲夏草真偽的PCR引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO.1-2所示。
2.一種鑒別冬蟲夏草真偽的PCR試劑盒，其特征在于，它包括如權利要求1所示的引物。
3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，它還包括Taq DNA聚合酶、PCR緩沖液和dNTP。
4.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，它還包括冬蟲夏草DNA陽性對照品。
5.一種鑒別冬蟲夏草真偽的PCR方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)提取待測樣品的DNA；
2)以所得DNA為模板進行PCR反應；
3)電泳檢測PCR產物；
步驟2)中使用序列如SEQ ID NO.1-2所示的引物；
若步驟3)檢測到介于100-200bp條帶，或者檢測到與冬蟲夏草DNA陽性對照品擴增條帶大小一致的條帶，即可判斷冬蟲夏草為真品，否則判斷為偽品。
6.如權利要求5所述的PCR方法，其特征在于，步驟2)的反應的退火溫度是50～58℃，優選為58℃。
7.如權利要求6所述的PCR方法，其特征在于，步驟2)的反應程序是：
a.95℃預變性3分鐘；
b.95℃30秒，58℃30秒，72℃30秒，循環反應25-35次；
c.72℃延伸5分鐘。
8.如權利要求7所述的PCR方法，其特征在于，步驟2)的子步驟b中，循環反應次數為30次。
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