[發明專利]一種基于金納米簇熒光增強的乳酸檢測方法

有效

• 申請號: 201911040989.8
• 申請日: 2019-10-30
• 公開（公告）號: CN110699422B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發明（設計）人: 王光麗;孫冬雪;李蘋;吳秀明
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12Q1/32
• 分類號: C12Q1/32;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于金納米簇熒光增強的乳酸檢測方法，其特征在于：

a、金納米簇的合成：在劇烈攪拌下將HAuCl₄溶液與表面包覆劑溶液混合后，向其加入0.2mL一定濃度的NaOH溶液，并在37℃劇烈攪拌下反應一定時間；所得產物用半透膜在超純水中透析24小時，儲存在4℃下備用；

b、乳酸的熒光檢測：首先，在0.2M的pH＝7.5的磷酸緩沖中，將1.0mM的氧化型輔酶，6.0mg/mL的乳酸脫氫酶和不同濃度的乳酸溶液混合并在37℃下孵育30分鐘；然后，將1.0mg/mL的心肌黃酶和1.0mM的鐵氰化鉀加入上述溶液中并在37℃下繼續反應30分鐘；最后，加入40μL的金納米簇并用0.2M pH＝5的磷酸緩沖稀釋至1.0mL，在400nm的激發波長下測量溶液的熒光強度。

2.根據權利要求1所述的一種基于金納米簇熒光增強的乳酸檢測方法，其特征在于制備金納米簇材料時選用的表面包覆劑來自牛血清白蛋白或谷胱甘肽。

3.根據權利要求1所述的一種基于金納米簇熒光增強的乳酸檢測方法，其特征在于制備金納米簇材料時加入的NaOH溶液的濃度為0.8-1.5M。

4.根據權利要求1所述的一種基于金納米簇熒光增強的乳酸檢測方法，其特征在于制備金納米簇材料時的攪拌反應時間為22-26小時。

5.根據權利要求1所述的一種基于金納米簇熒光增強的乳酸檢測方法，其特征在于乳酸的熒光檢測中所選用的氧化型輔酶選自氧化型輔酶Ⅰ或氧化型輔酶Ⅱ。