[發明專利]一種Toll樣受體配體蛋白在抗細菌感染中的應用

在審

• 申請號: 201911040697.4
• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN110714000A
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發明（設計）人: 尹一兵;李思杰;舒釗徹;張紅;張雪梅
• 申請（專利權）人: 重慶醫科大學
• 主分類號: C12N9/52
• 分類號: C12N9/52;C12N15/57;C12N15/70;A61K39/09;A61P31/04
• 代理公司: 31219 上海光華專利事務所(普通合伙)
• 代理人: 尹麗云

本發明提供一種Toll樣受體配體蛋白在抗細菌感染中的應用。本發明的肺炎鏈球菌肽鏈內切酶O(PepO)為Toll樣受體2及Toll樣受體4的配體，可顯著增強巨噬細胞對病原菌的吞噬及殺傷作用，并可上調相關細胞因子與趨化因子的分泌，從而誘導強烈的固有免疫反應，增強呼吸道對病原菌感染的抵抗力。

技術領域

本發明涉及醫藥生物技術領域，具體涉及一種Toll樣受體配體蛋白在抗細菌感染中的應用，特別涉及肺炎鏈球菌肽鏈內切酶O在抗細菌感染中的應用。

背景技術

抗生素是治療細菌感染性疾病的主要藥物，然而由于抗生素的大范圍長期濫用，促使耐藥菌甚至多重耐藥菌的爆發式出現，導致目前抗生素的臨床療效越來越差。在世界衛生組織(World Health Organization，WHO)列出的2019年全球十大健康威脅中，其中一項就是抗生素耐藥。可見因此細菌感染仍是目前威脅人類健康的主要問題之一，迫切需要研發新的治療藥物。然而，新型抗生素的研發遠遠不能滿足臨床需要，因此我們亟需尋找新策略來應對細菌感染性疾病。

眾所周知，宿主是有多種免疫防御機制抵抗病原體，病原體感染的發生都與機體的免疫減弱或紊亂相關，因而，通過調控機體自身的免疫功能來對抗病原體也應當是一種有效的手段。這一研究思路在針對腫瘤的免疫療法中取得了很大的成功，代表性成果即為免疫檢查點抑制劑(如以PD-1/PD-L1和CTLA-4為靶標的抑制劑)的研發和應用。

Toll樣受體(Toll-like receptors，TLRs)是重要的模式識別受體，其識別病原體相關分子模式后參與一系列免疫反應，包括吞噬細胞的吞噬殺菌作用、抗原提呈細胞的抗原提呈作用等。因此，以TLRs為靶點的物質被認為具有免疫調節劑的作用，可能有潛在的治療價值。目前已有一些研究證明了TLRs激動劑對細菌感染的免疫治療的可能性。如TLR7的激動劑咪喹莫特(Imiquimod)和TLR7/8的激動劑瑞喹莫德(Resiquimod)已在臨床上用于病毒感染的治療。近年來的研究表明，TLRs配體在細菌感染的治療中也有可能發揮作用。如人工合成的TLR4配體AGPs對產單核李斯特菌和鼠疫耶爾森菌感染具有保護作用；寄生蟲來源的蛋白ES-62與TLR4結合后，通過阻斷MyD88/NF-κB信號通路改善膿毒癥中的免疫失調，具有顯著的治療效果；TLR2/6的激動劑MALP-2可增強巨噬細胞的吞噬作用，顯著降低流感病毒-肺炎鏈球菌共感染小鼠的死亡率和肺部的菌載量，并對銅綠假單胞菌感染具有保護作用。

但是，迄今為止沒有出現過能與TLR2及TLR4結合的雙配體蛋白/多肽并應用于治療抗細菌感染疾病的報道。

發明內容

鑒于以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種Toll樣受體配體蛋白在抗細菌感染中的應用，用于解決現有治療策略中抗細菌感染性疾病的藥物存在的耐藥性和不良副作用等問題。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明一方面提供一種TLR2/4雙配體蛋白質或多肽，所述蛋白質或多肽為肺炎鏈球菌肽鏈內切酶O，其基因序列為核酸序列SEQ ID NO.1所示的多肽片段，蛋白序列為氨基酸序列SEQ ID NO.2所示的多肽片段。

本發明第二方面提供一種分離的或純化的上述蛋白質或多肽。

本發明第三方面提供一種分離的多核苷酸，編碼如上所述的蛋白質或多肽。

可選地，所述多核苷酸的序列包括如下序列中的至少一種：

(1)如SEQ ID NO.1所示的片段或其RNA等同物；

(2)與(1)中任意序列互補的序列；

(3)與(1)或(2)中的序列編碼相同蛋白質或多肽的序列；

(4)如SEQ ID NO.2所示的片段或其RNA等同物；

(5)與(4)中任意序列互補的序列；