[發明專利]鮮魚腥草藥材的UPLC特征圖譜建立方法和檢測方法

有效

• 申請號: 201911038448.1
• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN110672751B
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發明（設計）人: 徐杰;梁志毅;張志鵬;魏梅;黃夢婷;鄧李紅;田清清;魯云;程學仁
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 向薇

本發明涉及一種鮮魚腥草藥材的UPLC特征圖譜建立方法和檢測方法。該UPLC特征圖譜建立方法包括如下步驟：對照品溶液的制備；供試品溶液的制備：取鮮魚腥草藥材，切碎后加入體積分數為70～95％的甲醇水溶液或甲醇進行提取，提取液過濾，取續濾液，得供試品溶液；吸取所述對照品溶液和供試品溶液，注入超高效液相色譜儀中進行檢測，所述超高效液相色譜儀采用的流動相A為乙腈，流動相B為體積分數為0.05～0.15％的磷酸水溶液，洗脫方式為梯度洗脫。該UPLC特征圖譜建立方法能夠建立獲得鮮魚腥草藥材的特征圖譜，填補了現有技術的空白，且質量檢測全面、可靠，同時用時較短，便于大規模推廣應用。

技術領域

本發明涉及中藥質量檢測技術領域，特別是涉及一種鮮魚腥草藥材的UPLC特征圖譜建立方法和檢測方法。

背景技術

鮮魚腥草為三白草科植物蕺菜(Houttuynia cordata Thunb.)的新鮮全草，研究表明，鮮魚腥草藥材含有揮發油、有機酸類、黃酮類、酚類和生物堿類等化合物，具有清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋的功效，主要用于肺膿瘍、痰熱咳嗽、熱痢熱淋、癰瘡腫毒等癥，是衛生部正式確定的“藥膳兼用型”植物資源之一，也是歷版《中國藥典》收載的常見的鮮品中藥材，具有廣闊的經濟和藥用價值。但2015年版《中國藥典》僅規定了鮮魚腥草藥材的性狀及薄層鑒別，尚未規定其指標成分的含量檢測項，不利于鮮魚腥草的質量控制。

就目前的技術發展而言，以單一成分作為評價指標已不能全面反映鮮魚腥草藥材的質量，通過建立指紋或特征圖譜則可較為全面表征其整體化學成分特征信息?，F有的針對魚腥草的特征圖譜大多是針對干魚腥草或干魚腥草制劑的，而鮮魚腥草是中國藥典規定的魚腥草項下有別于干魚腥草的一種鮮品中藥材，相較于干魚腥草，鮮魚腥草現采即用，未經任何加工處理，有效成分得以最大程度的保留，特征圖譜所反映化學成分信息也存在差異。且目前關于魚腥草指紋(或特征)圖譜的檢測均采用的是高效液相色譜法(HPLC)，檢測耗時較長(30～90分鐘)、試劑用量大、檢測成本高，不利于全面推廣應用。

發明內容

基于此，有必要提供一種鮮魚腥草藥材的UPLC特征圖譜建立方法。該方法能夠構建鮮魚腥草藥材的特征圖譜，填補了現有技術的空白，且質量檢測全面、可靠，同時用時較短，便于大規模推廣應用。

一種鮮魚腥草藥材的UPLC特征圖譜建立方法，包括如下步驟：

對照品溶液的制備：取新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷和槲皮苷對照品，加溶劑溶解，得對照品溶液；

供試品溶液的制備：取鮮魚腥草藥材，切碎后加入體積分數為70～95％的甲醇水溶液或甲醇進行提取，提取液過濾，取續濾液，得供試品溶液；

將所述對照品溶液和供試品溶液注入超高效液相色譜儀中進行檢測，所述超高效液相色譜儀采用的流動相A為乙腈，流動相B為體積分數為0.05～0.15％的磷酸水溶液，洗脫方式為梯度洗脫。

在其中一個實施例中，所述梯度洗脫包括如下程序：

0～7min，流動相A的體積百分比由5％上升至11％；

7～10min，流動相A的體積百分比由11％上升至11.5％；

10～13min，流動相A的體積百分比由11.5％上升至20％；

13～20min，流動相A的體積百分比由20％上升至25％。

在其中一個實施例中，所述超高效液相色譜儀的條件包括：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；檢測波長：200～400nm；流速：0.25～0.35mL/min；柱溫：25～35℃。

在其中一個實施例中，所述檢測波長采用程序波長：0～13分鐘為326nm，13～20分鐘為254nm。