[發明專利]一種水稻粒重相關的OsGASR9基因及應用、蛋白質、表達載體和轉基因水稻的方法

在審

• 申請號: 201911038016.0
• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN110643617A
• 公開（公告）日: 2020-01-03
• 發明（設計）人: 李相伯;周勇;朱韻;梁國華;繆軍;史雙月;陶亞軍;彭秀榮;李暢;楊澤峰
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/84;A01H5/10;A01H6/46
• 代理公司: 11569 北京高沃律師事務所
• 代理人: 呂紀濤

本發明提供了一種水稻粒重相關的OsGASR9基因及應用、蛋白質、表達載體和轉基因水稻的方法，屬于植物基因工程技術領域，所述OsGASR9基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本發明將OsGASR9基因插入到載體后，得到的表達載體再轉化到水稻中，使得OsGASR9基因在水稻中進行過表達，增加了水稻種子的粒長和粒寬，提高了水稻種子的千粒重，而且提高了水稻單株的產量。

技術領域

本發明屬于植物基因工程技術領域，尤其涉及一種水稻粒重相關的 OsGASR9基因及應用、蛋白質、表達載體和轉基因水稻的方法。

背景技術

水稻是我國重要的糧食作物，水稻的持續穩定生產對保障糧食安全和農業可持續發展具有重要意義。我國水稻生產經過高產育種、超高產育種、超級稻育種和綠色超級稻育種等計劃的實施，產量提高明顯，實現了產需平衡略有余(程式華,中國農業科學,2016,49(2):205-206)。但隨著我國人口的持續增加，耕地面積和自然資源減少，以及環境的惡化，提高水稻產量和品質仍是保障我國糧食安全和社會穩定的重大需求。粒重作為水稻產量的重要構成因子，與產量形成密切相關(Shomura等,Nature Genetics,2008,40: 1023-1028；Zuo and Li,Annual Review of Genetics,2014,48:99-118)。

與傳統育種相比，分子育種具有選擇效率高、育種周期短等優勢，而開展分子育種的基礎是重要目標性狀基因的克隆和功能研究，準確了解了目標基因的生物學功能和遺傳效應才能開展分子育種。因此，挖掘水稻粒重調控相關基因，闡明其效應并應用于育種實踐，就可以為開展水稻高產分子育種提供重要遺傳信息和基因資源。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種水稻粒重相關的OsGASR9基因及應用、蛋白質、表達載體和轉基因水稻的方法，本發明提供的OsGASR9 基因具有提高水稻粒重的作用。

為了實現上述發明目的，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供了一種水稻粒重相關的OsGASR9基因，所述OsGASR9基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本發明還提供了上述技術方案所述的OsGASR9基因在提高水稻粒重中的應用。

本發明還提供了一種上述技術方案所述的OsGASR9基因編碼的蛋白質，所述蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

本發明還提供了一種表達載體，將上述技術方案所述的OsGASR9基因插入到初始載體中，得到表達載體。

優選的，所述初始載體包括pC1300Actin-3×Flag載體。

優選的，所述表達載體的構建方法包括以下步驟：

1)提取水稻葉片總mRNA，將所述總mRNA反轉錄為cDNA，以所述 cDNA為模板用擴增引物對進行PCR擴增，得到擴增產物，將所述擴增產物與pLB-Simple載體連接、熱擊、轉化大腸桿菌，將得到的轉化物在含氨芐青霉素的培養基上培養，得到陽性克隆，提取得到質粒；

所述擴增引物對包括擴增上游引物和擴增下游引物，所述擴增上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述擴增下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

2)將所述步驟1)得到的質粒經Xma I和Xba I雙酶切，得到OsGASR9 基因；將pC1300Actin-3×Flag載體經Xma I和Xba I雙酶切，得到酶切載體；將所述OsGASR9基因和酶切載體經T4連接酶連接，得到表達載體。