[發(fā)明專利]動(dòng)力學(xué)分析檢測水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測方法

在審

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• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN110927147A
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高康復(fù);高潔;王建山;駱穩(wěn)寧;鄭智博
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西金色科技有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 西安智邦專利商標(biāo)代理有限公司 61211
• 代理人: 張舉

1.一種動(dòng)力學(xué)分析檢測水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于：具體按照以下步驟實(shí)施：

步驟1、試液的配置；

分別配置緩沖溶液、顯色溶液和乙酰膽堿酯酶溶液；

步驟2、樣品液的制備；

選取被測樣本，加入適量步驟1中所述的緩沖溶液，經(jīng)振搖后靜置，再提取上清液，所述上清液為樣品液；

步驟3、對照液的測定；

取2mL～10mL步驟1中得到的緩沖溶液，加入步驟1中得到的乙酰膽堿酯酶溶液0.1mL～0.2mL，搖勻后于30～40℃水浴鍋中放置5～15min，再加入步驟1中得到的顯色溶液0.1mL～0.2mL并搖勻得到對照液；在動(dòng)力學(xué)模式下測定該對照液的吸光度；通過吸光度計(jì)算對照液吸光度變化速率k1；

步驟4、樣品液的測定；

向步驟2中所得到的樣品液中加入2～10mL所述緩沖溶液，再加入步驟1中得到的乙酰膽堿酯酶溶液0.1mL～0.2mL，搖勻后于37℃水浴鍋中放置5～15min，然后加入步驟1中得到的顯色溶液0.1mL～0.2mL并搖勻得到測試液；在動(dòng)力學(xué)模式下測定該測試液的吸光度；通過吸光度計(jì)算測試液吸光度變化速率k2；

步驟5、計(jì)算酶抑制率，進(jìn)行結(jié)果判定；

通過步驟3得到的對照液吸光度變化速率k1和步驟4得到的測試液吸光度變化速率k2計(jì)算酶抑制率：

則當(dāng)抑制率≥50％時(shí)，表示測試樣品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種動(dòng)力學(xué)分析檢測水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于：所述步驟1具體按照以下步驟實(shí)施：

步驟1.1、配置緩沖溶液；

分別稱取11.9g無水磷酸氫二鉀及3.2g磷酸二氫鉀，溶解于1000mL水中，混勻得到緩沖溶液；

步驟1.2、配置顯色溶液；

顯色溶液由DTBN、碘化乙酰硫代膽堿、碳酸氫鈉以及步驟1.1中配置的緩沖溶液組成，滿足DTBN的質(zhì)量、碘化乙酰硫代膽堿的質(zhì)量、碳酸氫鈉的質(zhì)量及緩沖溶液的體積之比為8mg：8mg：0.8mg：1mL，顯色溶液在4℃的冰箱中保存，保存期不超過兩周；

步驟1.3、乙酰膽堿酯酶溶液在4℃的冰箱中保存。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種動(dòng)力學(xué)分析檢測水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于：所述步驟1.1中的緩沖溶液的ph值等于8。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種動(dòng)力學(xué)分析檢測水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于：

步驟2中所述被測樣本為水果，則步驟2是將待測水果粉碎并稱取3g，加入10ml緩沖溶液，振搖多次并靜置兩分鐘以上，提取上清液；

或者，

步驟2中所述被測樣本為蔬菜，將步驟2是待測蔬菜表面泥土除去后，稱取3g待測蔬菜，用10ml緩沖溶液將3g待測蔬菜反復(fù)沖洗表面數(shù)次，靜置后再提取上清液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種動(dòng)力學(xué)分析檢測水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于：步驟3和步驟4中所述的動(dòng)力學(xué)模式下測定的是30s～5min內(nèi)的吸光度變化，每隔1～5秒記錄一個(gè)吸光度，將記錄的數(shù)據(jù)用slope函數(shù)進(jìn)行線性一次方程擬合，得到對照液吸光度變化速率k1和測試液吸光度變化速率k2。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一所述的一種動(dòng)力學(xué)分析檢測水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于：被測樣本為水果，則所用容器均為離心管；或者，被測樣本為蔬菜，則所用容器均為表面皿。