[發明專利]檢測人腸道細菌的組合物、試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201911037195.6
• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN110699468B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 任小梅;劉佳;鄧中平;戴立忠
• 申請（專利權）人: 圣湘生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/14;C12Q1/06;C12R1/46;C12R1/145;C12R1/01
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 胡亮;張穎玲

本發明涉及分子生物學檢測領域，具體的，涉及人腸道細菌檢測領域。本發明提供了一種組合物，其檢測雙歧桿菌屬(BIF)、鏈球菌屬(STR)、擬桿菌屬(BAC)、乳酸菌屬(LAC)、柔嫩梭菌(CLEP)、普拉梭菌(FAE)、直腸真桿菌(ER)共7種腸道細菌；與此同時，還提供了所述組合物用于檢測人腸道細菌的用途、包含所述組合物的試劑盒以及用于檢測人腸道細菌的方法。

技術領域

本發明屬于分子生物學檢測領域，具體的，屬于人腸道細菌的檢測領域；更具體的，所述腸道細菌包括雙歧桿菌屬(BIF)、鏈球菌屬(STR)、擬桿菌屬(BAC)、乳酸菌屬(LAC)、柔嫩梭菌(CLEP)、普拉梭菌(FAE)和直腸真桿菌(ER)共7種腸道細菌。

背景技術

腸道微生物指動物腸道中存在的數量龐大的微生物，這群微生物依靠動物的腸道生活，同時幫助寄主完成多種生理生化功能。在正常情況下，人體內的腸道微生物形成了一個相對平衡的狀態，一旦平衡受到破壞，如服用抗生素、放療、化療、情緒壓抑、身體衰弱、缺乏免疫力等，就會導致腸道菌群失去平衡，從而進一步影響機體的健康。

通過建立腸道菌群與特定的健康狀況之間的關系，將有助于通過分析腸道菌群分布獲得對個體是否患有特定疾病進行評估。

因此，在腸道細菌檢測領域，存在對特定腸道細菌組合進行檢測，以便評估機體的某一或某些具體健康狀況的需求。

發明內容

為了尋找腸道菌群組合與特定健康狀況之間的聯系，發明人研究了腸道微生物的作用，發現通常認為：乳酸菌能夠調節機體胃腸道正常菌群、保持微生態平衡，提高食物消化率和生物價，降低血清膽固醇；雙歧桿菌作為一種生理性有益菌，對人體健康具有生物屏障、營養作用、抗腫瘤作用、免疫增強作用、改善胃腸道功能、抗衰老等多種重要的生理功能；擬桿菌正常寄居于人和動物的腸道、口腔、上呼吸道和生殖道，因長期應用廣譜抗生素、激素、免疫抑制劑等，而使機體免疫功能紊亂或菌群失調時，能導致內源性感染；柔嫩梭菌產生短鏈脂肪酸，對腸道功能的調節有很重要的作用；普拉梭菌能夠產生抗炎因子，保護腸道健康；直腸真桿菌產生短鏈脂肪酸，對腸道功能的調節有很重要的作用；鏈球菌屬是腸道常見定植細菌，當機體免疫力降低時會引起炎癥疾病，如腦膜炎、肺炎等。

而對于健康狀況與腸道微生物的對應關系，通常認為與健康者相比，結直腸癌患者糞便中的擬桿菌屬菌群增加，而有益菌菌群(如雙歧桿菌)有所減少；與健康者相比，糖尿病患者糞便中的雙歧桿菌會有所減少；冠心病患者腸道菌群中的鏈球菌含量增加，雙歧桿菌、乳酸桿菌含量減少；腹瀉人群中擬桿菌屬、鏈球菌屬的變化幅度比無明顯癥狀人群高30％，同時瀉藥的使用會導致真桿菌的顯著降低；抑郁癥患者糞便中擬桿菌屬、乳酸菌和雙歧桿菌的數量明顯不足。因此，對腸道微生物的豐度進行檢測，有便于腸道健康狀況的評估，進而有便于整個機體的健康狀況的評估。因此，發明人發現這7種細菌的組合能夠評估整個機體的健康狀況。

此外，發明人經過大量研究，進一步發現：2型糖尿病患者與正常人的腸道內的產丁酸菌以及擬桿菌的豐度存在明顯差異(A?metagenome-wide?association?study?of?gutmicrobiota?in?type?2diabetes[J].Nature,2012,490(7418):55-60.)，產丁酸菌代表菌為柔嫩梭菌、直腸真桿菌、普拉梭菌；同時還有文獻指出糖尿病患者腸道中的雙歧桿菌也會有所減少。吳曉康等，在2型糖尿病患者腸道的鏈球菌屬的研究中也發現，2型糖尿病患者的鏈球菌菌群顯著下降。而乳酸菌是能夠調節機體胃腸道正常菌群、保持微生態平衡，提高食物消化率和生物價，降低血清膽固醇，其也與糖尿病有著密切關系。也就是說，特別地，發明人發現了以上7種細菌的組合能夠用于評估糖尿病的風險。

因此，本發明提供了一種檢測腸道細菌的組合物，所述腸道細菌由雙歧桿菌屬(BIF)、鏈球菌屬(STR)、擬桿菌屬(BAC)、乳酸菌屬(LAC)、柔嫩梭菌(CLEP)、普拉梭菌(FAE)和直腸真桿菌(ER)組成，所述組合物包括：