[發明專利]檢測人腸道細菌的組合物、試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201911037195.6
• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN110699468B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 任小梅;劉佳;鄧中平;戴立忠
• 申請（專利權）人: 圣湘生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/14;C12Q1/06;C12R1/46;C12R1/145;C12R1/01
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 胡亮;張穎玲

1.一種檢測腸道細菌的組合物，所述腸道細菌由雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、擬桿菌屬、乳酸菌屬、柔嫩梭菌、普拉梭菌和直腸真桿菌組成，所述組合物包括：

BIF的檢測試劑：如SEQ?ID?NO:1所示的BIF上游引物、如SEQ?ID?NO:2所示的BIF下游引物和如SEQ?ID?NO:5所示的BIF探針；

STR的檢測試劑：如SEQ?ID?NO:3所示的STR上游引物、如SEQ?ID?NO:4所示的STR下游引物和如SEQ?ID?NO:6所示的STR探針；

LAC的檢測試劑：如SEQ?ID?NO:7所示的LAC上游引物、如SEQ?ID?NO:8所示的LAC下游引物和如SEQ?ID?NO:11所示的LAC探針；

BAC的檢測試劑：如SEQ?ID?NO:9所示的BAC上游引物、如SEQ?ID?NO:10所示的BAC下游引物和如SEQ?ID?NO:12所示的BAC探針；

FAE的檢測試劑：如SEQ?ID?NO:13所示的FAE上游引物、如SEQ?ID?NO:14所示的FAE下游引物和如SEQ?ID?NO:19所示的FAE探針；

CLEP的檢測試劑：如SEQ?ID?NO:15所示的CLEP上游引物、如SEQ?ID?NO:16所示的CLEP下游引物和如SEQ?ID?NO:20所示的CLEP探針；以及

ER的檢測試劑：如SEQ?ID?NO:17所示的ER上游引物、如SEQ?ID?NO:18所示的ER下游引物和如SEQ?ID?NO:21所示的ER探針；

其中，所述組合物以3個試劑組合的形式存在：

試劑組合1：FAE的檢測試劑、CLEP的檢測試劑和ER的檢測試劑；

試劑組合2：BIF的檢測試劑、STR的檢測試劑、LAC的檢測試劑和BAC的檢測試劑中的任意兩種；以及

試劑組合3：其余兩種檢測試劑。

2.根據權利要求1所述的組合物，其中，所述組合物以3個試劑組合的形式存在：

試劑組合1：FAE的檢測試劑、CLEP的檢測試劑和ER的檢測試劑；

試劑組合2：LAC的檢測試劑和BAC的檢測試劑；以及

試劑組合3：BIF的檢測試劑和STR的檢測試劑。

3.根據權利要求2所述的組合物，其中，所述試劑組合1中的各探針的熒光基團彼此不同；所述試劑組合2中的各探針的熒光基團彼此不同；所述試劑組合3中的各探針的熒光基團彼此不同。

4.根據權利要求3所述的組合物，其中，所述試劑組合中的探針的熒光報告基團選自FAM、HEX、ROX、VIC、CY5、5-TAMRA、TET、CY3和JOE。

5.根據權利要求4所述的組合物，其中，如SEQ?ID?NO:5、11、19所示的探針的熒光基團為FAM，如SEQ?ID?NO:6、12、20所示的探針的熒光基團為HEX；SEQ?ID?NO:21所示的探針的熒光基團為ROX。

6.權利要求1~5中任一項所述的組合物在制備檢測人腸道細菌的試劑盒中的用途。

7.一種用于檢測人腸道細菌的試劑盒，所述試劑盒包括上述權利要求1~5中任一項所述的組合物。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，其中，所述試劑盒還包括核酸提取試劑、dNTP、Mg²⁺、DNA聚合酶、PCR緩沖液中的至少一種。

9.根據權利要求8所述的試劑盒，其中，各組分的終濃度的范圍如下所示：Mg^2+?2~6mM、dNTP?0.1~0.4mM、DNA聚合酶2~30U、引物100~500nM、探針50~250nM。